Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Feliz año a todos, en cuanto tenga tiempo intentaré ponerme al día de todos los post, que hay muchos...

Quería deciros que vuelvo a tener semillas de Bletilla striata para quien esté interesado en participar en el nuevo "proyecto germina" del blog aquí encontrareis instrucciones www.orquideoteca.blogspot.com

No me envieis mensajes privados por ahora, tengo que vaciar los buzones están llenos y no los recibo.

Saludos,

Olivia

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Danfer.
Si te contactas con Orquidaria puede ser que consigas:
http://www.orquidaria.com
O con el vivero del Ing. Alfredo Manrique
Te invito a navegar también por el foro "El Perú y sus Orquídeas" serás bienvenido:
http://www.infojardin.com/foro/showthread.php?t=301477
Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Gracias Monstera ....este finde hare mi primer intento ,deseame acierto

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

buenas tardes CARLOS. BUENO ME INTERESA APRENDER COMO HACER GERMINAR LAS SEMILLAS DE LAS ORQUIDEAS Y AL PARECER TU SABES MUCHO DE ESTO, BUENO TE AGRADESERIA MUCHO SI ME PUDIERAS AYUDAR , GRACIAS.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Estimado Dafer Alejandro
Yo soy el mas nuevo de los novatos de este tema
La unica diferencia es que soy persistente y vivo probando siempre
Si vas a iniciarte en estos cultivos, preparate para un sin fin de desaciertos.
Casi imitando a Don Thomas Alva Edision que despues de mas de 1000 ensayos al fin perfecciono la bombilla electrica. SEA PERSISTENTE Y NO SE DESANIME.
Preparate con una 4 o 6 capsulas desarrolladas y asi con unos varios miles de semillas, algunos 50 frascos y tal vez se pueda hacer algo . . .
Estamos aqui en Mexico cd Monterrey en Invierno con tem de 6 C a 20 C . por eso me detuve entodas mis actividades.
Mi ciudad es de clima extremoso, en una semana puede variar de 30 C y en la misma semana una vez bajo a -10 C . Pero este clima extremoso hace que las Phalenopsis tengas floraciones bien abundantes, pues en el frio entran en latencia Invernal y con el calor de feb tienen adundantes varas florales, Yo vi en un Keki de escasos 2 años desarrollar 3 varas y eso fue casi insolito
Voy a concretar toda la metodologia de siembra con los pertinentes cambios que he visto dan resultado.
Por lo pronto ya sembre mi propia Tomatera para tener tomates premium madurados enla planta

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

muchas gracias CARLOS, BUENO ENTONCES INICIARE LOS INTENTOS PORQUE YA TENGO BASTANTE INFORMACION Y VEREMOS QUE PASA, TENGO ALGUNAS SEMILLAS QUE AUN NO MADURAN DE CATTLEYAS , SINBIDIUM Y PHAELONOCCIS. AL MADURAR INICIARE EL EXPERIMENTO , YA LOS MANTENDRE INFORMADOS.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola chicos,

POR FIN TERMINE DE LEERME TODO EL HILO!!!

Felicidades, hacéis que a cualquiera le entre el gusanillo sobre el tema, jejjeje

Bueno, pues debido que voy a cortarle las varas a una phal por cuestiones de salud, las voy a aprovechar para mis primeros pinitos en la in-vitro, a ver que tal, así voy cogiendo practica.

Y sobre tema de la esterilización, algunos habéis puesto fotos de botes con hongos empezando por uno de los lados, y que la principal causa es que entre contaminación en el bote, evidentemente por la tapa, ya que no quede totalmente sellado al vacío y por el traslado de los botes, por eso se le pone el film o el papel de aluminio.

Entonces me ha venido la idea a la cabeza de usar cinta de teflón (la que usan los fontaneros para sellar totalmente las roscas de las tuberías y que no haya fugas), alrededor de la boca de los botes, con lo que ahí no habría forma que entrara nada de nada, ni aunque hubiera quedado algún resto entre la rosca de la tapa o el bote sin esterilizar completamente. El teflón se podría hervir tranquilamente junto con los botes, y luego solo seria darle un par de vueltas en las roscas y después cerrar cada bote.

El teflón aguanta temperaturas de entre -20º y 300º, es resistente a la mayoría de las bases y ácidos, y es insoluble a muchos disolventes orgánicos.

Un saludo a todos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Buenos dias ......permitidme una pregunta en las semillas que todavia no han terminado de madurar como separais las semillas del "algodon" que hay dentro de las capsulas,yo lo he intentado pero..no con demasiado exito i ya puestos es perjjudicial que caiga algodon junto a las semillas en el cultivo o debe separarse por completo i dejar solo las semillas,
Gracias por vuestro tiempo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola que tal?? bueno yo también comence a experimentar con los "invitro" pero tengo algunas dudas.... primera, antes de que cuaje el agar se evapora algo de agua que queda en el frasco, cuando cuaja, empiezan a condezar y queda un poco de agua sobre el agar, esto es malo? como lo evito?

Además, para esterilizar los frascos con el agar use 2 metodos:
1.-Usando un esterilizador de biberones que es de baño María y la temperatura sube a 93° (por la altitud de Guadalajara 1500m)
2.-En un horno a 170 grados

En el caso del horno (2) el agar se desnaturalizó y jamás cuajó y en pocos dias aparecieron hongos
En el caso del baño María (1) el agar cuajó bien y noté menos contaminación
Mi pregunta es 93°C es suficiente temperatura para esterilizar??

Tambien noté que los frascos que cerré antes de esterilizar presentan menos contaminaciones que los frascos que deje la tapa solo sobre puesta. Pero supongo que tienen presiones muy bajas, algo asi como un semi vacio, es esto malo?

Espero sus comentarios

Saludos

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Caramelito!! Primero que todo, la condenzación no es mala, pero si es mucha no van a germinar tus orq, no hay problema si la derramas dentro de tu camara esteril para que no haya contaminación.

En cuanto a lo de tus preguntas las puedo responder a pesar de que no hayan germinado algunas de las que halla yo sembrado , pero en lo del medio si te puedo ayudar, yo prefiero esterilzar en olla de presión, solo coloco papel aluminio cubriendo las tapas de los frascos, SIN CERRAR, (pues la presión los rompe) yo solo los dejo 5 mins despues de que comienza a silbar la olla y despues la dejo enfriar aún cerrada por toda la noche, en la mañana la destapo y con las capas de aluminio puestas cierro los frascos (para que no se contaminen) ya fríos inclusive cuajados (para que no guarden presión negativa, pues cuesta mucho abrirlos dentro de la camara con los guantes puestos), y los guardo cinco días para descartar contaminación a temperatuara ambiente, si despues de este lapso no ha crecido nada anomalo dentro de ellos, los guardo en el refrigerador (no en el congelador) hasta su utilización en una camara esteril, el tiempo de ebullición es corto pues lo que mata a los bichos y también a los compuestos vitaminicos son las altas temperaturas y presiones, y cinco minutos bastan para matar a las bacterias sin afectar al agar ni a las vitamins!!



SALUDOS!!
PD. Espero haber ayudado y a ver si el carma se me regresa y ya germinan mis semillas ya van como 5 frascos fallidos!!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Muchas gracias Zarq, me queda la duda de que si tiene que ser por fuerza una olla a presión, porque el esterilizador de biberones que uso es un baño maría a presión atmosférica... sube a 93°C a 1 atm.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Y por cierto, Tienes mucha razón, veras que lo que te faltaba para que tus frascos no se infecten era darme una ayudita ami .

No dejes de contarme como te va.

Saludos

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

No soy experto, pero la temperatura y la presión, son las que matan algunas bacterias resistentes, los equipos para esterilizar en laboratorios (autoclaves) trabajan a 121ºC y 15 psi, las ollas de presión hacen un trabajo similar.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Se agradecen los buenos deseos, y si germina alguno de mis frascos les aviso va, también Carlos H me ha ayudado bastante!!!

Sergio Romero: Estas muy en los cierto, solo que 14,7 psi = 1 atmósfera y un autoclave trabaja en el rango de 20 a 32 psi, mientras que una olla de vapor a presión los abate facíl con unos 25-40 psi, que son como tres atmosferas, por eso a muchos compañeros sus agares se etropean pues sus enlaces moleculares se rompen, por eso poquito tiempo es lo recomendable!!


Por cierto alguíen me puede decir en que tiempo se debe observar un cambio en las semillas, tengo un frasco de casi 7 meses , creo que ya lo voy a tirar!!! Nadamas ocupa espacio!!!!



SALUDOS!!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Huy 7 meses y no ver ni los protocormos se me hace mucho a menos de que sea una orquidea muy peresosa, a qué temperatura y cuanta luz tiene? revisaste el pH?

Bueno tal vez 7 meses sin protocormos por otra parte puede ser un éxito al menos del primer paso, la esterilización, porque también son 7 meses sin contamiación!! ya solo falta el segundo paso, la germinación, yo estoy estancada aun el el primero,

Hoy hice otra camada de frascos, probando 2 ollas de presión y o el esterilizador de biberones, esta vez si puse carbón activado y desinfecte todo todo (cocina, ollas, charolas balanza) con un buen fungicida y bacterizida.

En unos dias les cuento como me fué.

Saludos