Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por Monstera, 3/4/08.

  1. aincioa

    aincioa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Tengo que sembrar este finde las últimas semillas que me quedan de Olivia, por eso digo que a ver si hay suerte. Los frascos anteriores van muuuuuuuuuy despacio, se ven puntitos en la superficie pero nada más.


    Gracias, las tuyas aún no han llegado, en cuanto me lleguen te hago saber.

    Saludos.
     
  2. robert..

    robert.. Montevideo

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    HOLA GENTE SI LO QUE PASA ES QUE EL FRASCO SE CONTAMINO Y NO QUICE REPICAR PORQUE YA LO HICE ANTES Y SE ME CONTAMINARON ESPERO QUE SE SALVE ALGUNA INTENTARE HACER ALGUNO GRACIAS POR EL CONSEJO.
    ya estoy rescatano los plantines mas pequeños para repicar a ver si sale algo los desinfectare un rato y bueno a usar la camara aceptica nuevamente, crusare los dedos para que no se me contaminen .
     
  3. orquicultor

    orquicultor

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    hola a todos
    voy a comentar una experiencia q ojala les funcione
    un dia encontre en la seccion amarilla un fabricante de filtros
    fui buscando un filtro HEPA (asi se les conoce) chico y en regular estado
    lo encontre y busque quien me hiciera el ventilador
    con la caja la hice de acrilico
    sigo teniendo errores de contaminacion , pero muchisimo menos
    y no me salio nada cara
    luego subo la foto
     
  4. robert..

    robert.. Montevideo

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    orquicultor buenisima la idea pon fotos .
     
  5. orquicultor

    orquicultor

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    mexico d f
    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    [​IMG]
    a ver si sale
     
  6. seca

    seca

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Orquicultor, me gustaría ver fotos de todo lo que has hecho con tus orquideas.

    Más fotos !

    : )
     
  7. Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Un saludo para todos, y feliz de iniciar esta nueva etapa en las orquideas.
    1° Formar una colección de ellas (7 años).
    2° Aprender a cultivarlas (Sigo en el aprendizaje).
    3° Aprender a polinizarlas, (Algunas variedades todavía se resisten).
    4° Esperar la formación de capsulas (Empezé a polinizar en Mayo).
    5° Preparación de medios de cultivo (2 Meses y en esta etapa 0 contaminación) 4 medios (el de piña no funcionó).
    6° Siembra de semillas (Hace 3 dias 7 capsulas 4 frascos por capsula y diferentes medios).
    Aquí viene el susto, y la pregunta ¿ a partir de que dia se empieza a ver la contaminación?, algunas capsulas las escogí de 3 meses y medio y creo que estaban inmaduras otras las sentí perfectas de 5 y medio meses, todas de diferentes Masdevallias.
    Fotos de esta etapa, la caja:

    [​IMG]

    Caja con frascos, Guantes (utilizé los de inseminar ganado), alcohol, hipoclorito agua destilada y herramientas.

    [​IMG]

    Las capsulas que utilizé

    [​IMG]

    De nuevo muchas gracias a todos especialmente a Monstera, an sido de mucha ayuda.
     
  8. robert..

    robert.. Montevideo

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    HOLA ALVARO MIRA NO SE SI LAS CAPSULAS ESTAN MADURAS YO NO USO CAPSULAS VERDES PUES NUNCA ME FUNCIONARON PERO SE QUE A OTROS SI NO SE EL TIEMPO DE MADURACION DE LAS MADEVALLIAS ES CUESTION DE PROBAR , YO USO LAS CAPSULAS CUANDO ESTAN AMARILLEANDO AHI LAS SACO DE LA PLANTA PORQUE EN UNOS DIAS SE QUEDA MARRON Y SE ABRE.
    BUENISIAMA TU CAMARA.
     
  9. Monstera

    Monstera

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Vaya cámaras mas chulas que teneis montadas!!

    Orquicultor, la tuya parece muy cómoda de usar al no tener cubierta frontal.

    Alvaro, la contaminación puede aparecer a los pocos días o tardar semanas. Incluso hay frascos que se contaminan meses después con cambios de temperatura.

    Según esta lista de tiempos, que es la más completa, la mayoría de las masdevalias necesitan de 4 a 6 meses para madurar.

    http://members.iinet.net.au/~barryg/SPECIES.htm

    Qué le pasó al medio de la piña?

    Un saludo,

    Olivia
     
  10. robert..

    robert.. Montevideo

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    HOLA MONSTERA BUENISIMO EL LINK QUE PUSISTE ESTA COMPLETITO GRACIAS.
    TE CUENTO TAMBIEN QUE HABLE CON UNA COLEGA DE LA GERMINACIONES IN VITRO POR EL TEMA DEL RUSTIFICADO DE LAS PLANTULAS LE MOSTRE LO QUE HICE Y ME DIJO QUE NO HABIA PROBLEMA QUE PODRIAN SALIR ADELANTE YA QUE ESTAMOS EN TIEMPO DE CALORES QUE LAS TRATARA COMO ADULTAS POR EL MOMENTO SIGUEN VIVAS.NO PUEDO ABRIR EL CUBICULO NADA DE AGREGAR AGUA NI CAMBIARLE EL AIRE TENGO QUE DEJARLO AHI DURANTE 10 DIAS YA QUEDA POCO EL DIA 18 CUMPLEN ESE TIEMPO YA PONDRE NOTICIAS .
    ESO SI ME DIJO QUE CUANTO MAS GRANDE SEAN MAS POSIBILIDADES DE RESISTIR EL CAMBIO.
     
  11. Monstera

    Monstera

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Robert,

    Está claro que si estaban contaminados no te quedaba mucha opción, suerte cone llas, ya nos contarás.

    Un saludo
     
  12. Sergio Romero

    Sergio Romero

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Necesito ayuda. Le comento que fracaso el 4 intento de siembra de semillas. Creo que no tengo problema en la fabricación del medio, ya que no se me contamina. Pero en menos de una semana después de la siembra se contamina.
    Utilizao semilla madura, la dejo 10 minutos en agua oxigenada al 2%, la lavo 3 veces con agua destilada esterilizada (3 min. cada vez) y luego la coloco en el medio. Utilizando la jeringa y el los frasco la coloco por un pequeño agujero en la tapadera. Si me pueden dar otro procedimiento para desinfectar las semillas, se los agradeceré mucho.
     
  13. aincioa

    aincioa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hoy he realizado una siembra con las últimas semillas de Monstera (gracias Olivia), te puedo contar cómo lo hago. Aún no se me ha contaminado ninguno, pero la germinación va muuuuuy lenta.

    La solución esterilizante es la ya comentada: lejía diluida al 1% con una gota de jabón de lavavajillas. Una aclaración:
    Si la lejía comercial tiene 40 gramos por litro 4% de hipoclorito de sodio, como la mía, se ha de mezclar con tres partes de agua destilada. (40gr/litro x 100ml + 0gr/litro x 300ml = 40gr/litro x 400ml = 1%).
    Preparo tres vasos, uno con la solución, otro con agua destilada y otro vacío. A veces un cuarto con agua oxigenada.

    Pongo una cazuela enorme, hierve-biberones, en mi caso a calentar agua, tapada para que vaya hierviendo el agua y creando vapor. Pongo dentro un hierro de los de microhondas para las pizzas.

    Tomo las semillas del papel y las meto dentro de una jeringa abierta. La cierro.
    La lleno chupando, casi hasta arriba de la solución esterilizante.
    Pongo un trozo de filtro de café y la aguja de la jeringa intramuscular (en mi caso es un dron, un cateter, cortado).
    Vacío la jeringa todo lo que puedo en un vaso, por si por accidente se rompe el filtro o se sale la aguja, poder recogerlo de vuelta.
    Ahora, la agito durante los diez minutos de rigor.

    De otro vaso tomo agua destilada, volteo bien y vacío de nuevo.Repito tres o cuatro veces esto. La última vez dejo uno o dos mililitros para que arrastren las semillas.
    Cada vez que vacío la jeringa en este proceso, se va obstruyendo la salida con las semillas con lo que al final el procesol es sacar líquido, chupar aire para desobstruir, sacar líquido, chupar aire, sacar líquido, chupar aire, sacar líquido, chupar aire hasta lograr vaciar la jeringa.

    Cuando está lista, abro la tapa de la cazuela; meto el bote a sembrar, lo desenrosco rápido sin levantar la tapa, me quemo, lo dejo en el hierro del microhondas, cojo la jeringa y la meto en el vapor, quito la aguja y el filtro, levanto un poco la tapa y vacío la jeringa del todo (si es muy rápido las semillas van a la pared del frasco en vez de al fondo).
    A veces meto la punta de la jeringa en el agua hirviendo por si acaso. Otras veces he de chupar agua oxigenada porque he dejado poco líquido en la jeringa, con lo que se complica un poco.
    Antes usaba una jeringa de 50ml. con la que uso ahora de 5ml. es más fácil la siembra porque el agujero de salida queda más centrado.

    Espero que te sirva de ayuda.

    Saludos
     
  14. aincioa

    aincioa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Veo mucho movimiento por aquí, y me alegro por todos.
    Esas cámaras de siembra son un auténtico lujazo. Y por cierto, yo tardaré más de 7 años ya que mi hija ha bajado la persiana de la ventana del salón y me ha roto todas las flores que había polinizado: dendro phal, nobile: cuatro phal, una cattleya, un oncidium, una miltasia y dos cambrias...:icon_evil:

    Saludos.:happy:
     
  15. orquicultor

    orquicultor

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    mi mas sentido pesame de tus plantas