Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

HLA RODY SI ES L. PURPURATA X C. FORBESII PERDON .
Y FELICES FIESTAS PERDIDO.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Amigo Rody, utilizo estos envases que sirven para venta de comida (chifa) delivery, pero transparente, los esterilizo con baños de alcohol y lejía, nada más.
Te comento que de iluminación utilizo luz natural, de 6am a 6pm, luego le agrego luz artificial (foco luz blanca) de 6pm a 10pm, total 16 horas, más que suficiente.
Saludos de Perú.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola a todos

He intentado leer este Post de principio a fin... pero ya es bastante largo...

Me han surgido varias preguntas que se que muchos de ustedes, por sus experiencias, podran responderme:

1. Si no utilizara agar-agar sino Gelatina sin sabor, ¿Debo agregar mas cantidad de la indicada para agar?. Si es asi, ¿Cuanto mas?

2. Para que un medio solidifique al utilizar gelatina sin sabor, ¿hay que ponerlo en la nevera? o ¿Solo con el ambiente natural solidifica?

3. ¿Con que tipos de frascos han trabajado y han notado que son resistentes al calor? (Es decir, no necesariamente hay que trabajar con vidrio Pirex o de laboratorio, quiza frascos de alimentos puedan resistir)

4. A la hora de hacer la siembra... ¿han trabajado sobre vapor de agua en ves de una camara esteril?. ¿Como fueron los resultados?

Puede que me sigan surgiendo dudas... estare visitando el post continuamente.

Gracias

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola les muestro la germinación de Bletia coccinea(orquídea terrestre de México) en el medio MS

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hay varios post en este hilo, en los que hablan del uso de la gelatina, creo que con buenos resultados. Las cantidades es cuestión de probar pocas cantidades hasta dar con la adecuada consistencia, ni piedra ni líquido. Más bien tirando a blando.
Al final es necesaria sólo para dar consistencia al medio. Debería quedar solidificada a temperatura 22-26ºC que es a la temperatura que germinan las semillas.
Yo sólo he trabajado con frascos de vidrio de esos que hacen plop al abrir, que contenían legumbres, pimientos, mermelada o papilla de "hero baby" esto me sirve para detectar fallos en la esterilización debidos al cierre no hermético de la tapa. Con botes de plástico se puede esterilizar en el microhondas, más fácil que en la olla o en el horno.
Yo he sembrado en vapor: reesultados dos botes contaminados de unos treinta. Otra cosa es la germinación que o es muy lenta o no me germinan por ahora. La mayoría se decanta por cámara estéril, ya que en principio es un método más seguro, menos experimental que el vapor.

Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Envidia malsana que me dais...

Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Segun otros comentarios sobre la gelatina, he comprobado que la gelatina sin sabor es inestable. Realicé medios de cultivo y demoraron toda la noche en solidificar. Solo uno no lo hizo, asi que para probar un poco, lo puse en la nevera donde si solidificó. Pasados 3 dias empezaron a des-gelatinizar. Ahora, estan mitad liquidos mitad solidos. Puse otro en la nevera, y pasada la noche, no solidifico. El que puse inicialmente en la nevera si permanece solido, pero, para poder hacer una siembra, necesitaria sacarlo a temperatura ambiente y es predecible que se volvera liquido tras un tiempo.

Quiza debo probar con mas cantidad de gelatina o re-buscar un agar-agar.

Una pregunta para ti aincioa: Cuando hablas de botes de plastico para esterilizar en microondas ¿te refieres a los recipientes que contienen el medio o a un recipiente que contenga los frascos de vidrio dentro del microondas? ¿cuanto tiempo debo poner al microondas para esterilizar correctamente?

Gracias!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Me refiero a botes para toma de muestras. Los venden por internet para siembra in-vitro.

Prueba con más cantidad de gelatina, la acidez del tomate puede influir en la necesidad de aumentar la cantidad de gelatina.


Tiempos para esterilizar en microhondas de 1000Watt con rotación del plato:

25 ml ----> 4-6 min
50 ml ----> 6-8 min
100 ml ---> 8-10 min
250 ml --->10-12 min

fuente: http://www.phytotechlab.com/pdf/EpiphyticOrchidSeedSowingKit.pdf página 6 tabla al final


Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Vaya, vaya, vaya!!!! Que enorme gusto muestras por tus plantas y seguro que tendrás muy buenos resultados de ello, pues por cuidados no paras.

Felicidades!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

para poder gelificar el medio es nesesario el agar? o existe otra cosa para gelificar el medio sin utilizar agar

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola,
la gelatina no suele recomendarse pues se puede volver líquida después de algunos dias por encimas que se encuentran en el guiso... sobre todo si se usan zumos y pulpa de fruta, tomates etc. Pasa igual con otras sustancias que en teoria su pueden usar, como maizena, almidón puro, pectina, etc.
Suerte,

Arturo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

En este hilo también se habló de la bentonita como gelificante.

Ayer hice medio a mitad de dosis y me salieron 10 frascos. A ver si no se contaminan y puedo usar las semillas qi¡ue me mandó el amigo.

También comentar que la phal amarilla ha conseguiido ligar cinco flores de siete, ¿cuántas se pueden polinizar al mismo tiempo?
Además estuve poliniizando un dendro nobile blanco que me eché por reyes a 9€. Los polinios son mucho más pequeños que los de las phal y hasta que no me hice con la anatomía de sus flores me costó polinizarlas, luego, eso sí, a toda velocidad con el resto. A ver si alguna liga.

Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

hola Monstera,
y a todos los demás.

Estoy buscando información sobre electricidad en los medios de cultivo in-vitro.
mirad esto:
http://www.springerlink.com/content/x8075774k1411912/
o esto:
http://www.jstor.org/pss/4271608
o esto otro:
http://jxb.oxfordjournals.org/content/36/7/1134.abstract
hay mas textos en internet que también tratan este tema pero son todos de pago y no los puedo encontrar liberados.

alguien sabe algo?
estoy preparando un hilo con mis experimentos; en cuanto tenga algo que enseñar lo cuelgo.

gracias de antemano y un saludo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

En mis tiempos mozos hice un experimento consistente en aplicar unos electrodos a una planta y mediante un complejo sistema de amplificación de impulsos eléctricos de muy baja frecuencia comprobar los cambios "de humor" de esas plantas con un osciloscopio o aún más impactante a la vez que intuitivo, en un altavoz. Los cambios de humor se debían a estímulos externos: sequedad, riego, luz, frio, calor... pero nunca usamos corrientes eléctricas.

Espero poder ver los resultados de tus experimentos, creo que suponen todo un desafío muy interesante.

Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

hola Aincioa,

me interesa muchísimo ese experimento que describes. podrías darme algo mas de info?
en tus años mozos?
a que clase de colegio ibas tú?


yo no soy científico y mis experimentos son mas estéticos y conceptuales que otra cosa. En cuanto inaugure el hilo lo entenderás mejor. Ya sabes cual es la primera cosa que se aprende con las plantas: paciencia...

hasta pronto