Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por Monstera, 3/4/08.

  1. tano22

    tano22

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    quise decir cloro y no cloto,,,,,,,,,,, el cloro es igual a lo ke algunos llaman leija
    saludos
     
  2. netpiolin

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola tano22, desinfectalas metidas en un filtro de café. Luego, con unas pinzas,las pones en los frascos.
     
  3. dakota20

    dakota20

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    okis tano22 , gracias
     
  4. tano22

    tano22

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    netpiolin gracias , pero ,,,, donde la pones una vez ke esta en el filtro de papel??? la pones en un frasco con la leija y sacudes 15 minutos??? o como es???saludos .dakota20 aver como sale lo tuyo suerte
     
  5. pelargonium

    pelargonium

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    yo las de Nepenthes las desinfecté en un recipiente con muy poca cantidad de solución de cloro+tensioactivo, así las podía "pescar" facil con las pinzas, enjuagarlas y meterlas en los frascos para que quedasen separadas entre sí.

    https://img3.***/img3/6475/dsc02697n.jpg

    Hice la prueba de poner las mismas especies en frascos y germinarlas normal.
    Germinaban mejor en frasco, pero me desarrollaban más rápido las que germinaban en medio no aséptico.
    (Hay que usar 1/4 MS . No usar concentración 100%!)
     
  6. Sergio Romero

    Sergio Romero

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Como se prepara el medio con el producto P668? Hay que agregarle agar agar? O solo es este producto? Gracias de antemano por la respuesta.
     
  7. netpiolin

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Las pones en un filtro de papel, lo doblas varias veces y lo grapas para que no se abra. Lo introduces en un frasco con la mezcla de cloro y agua (por cada 1ml de lejía que uses, añade 9ml de agua destilada). Las tienes durante unos 10 min. removiendo de vez en cuando. Sacas el sobre y lo metes en un frasco con agua para enjuagarlo. Aclaralo con agua limpia tres veces. Después abres el sobre y con unas pinzas vas poniendo las semillas en el frasco.
    Un saludo
     
  8. orquicultor

    orquicultor

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

     
  9. alansolanodiaz

    alansolanodiaz Alan

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola a todos, necesito de su ayuda, pues no logro que mi formula tenga una consistencia y textura uniforme,, como se ve en la foto, se nota como queda abajo el agar agar con los demas ingredientes, y arriba queda gelatinoso, pero muy flojito, que incluso con algunos movimientos bruscos, se deshace, y queda no tan duro y estoy haciendo todo al pie de la letra.

    Por ejemplo si compro el agar agar en barra, como puedo disolverlo de forma eficiente en el agua sin que hierva? O como es el procedimiento que ustedes hacen para disolver bien el agar agar y no se asciente, porque incluso en el vaciado al frasco, lo muevo constantemente para k no se asciente, pero no logro el resultado, que hago?????

    [​IMG]
     
  10. Monstera

    Monstera

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Alan,

    Un par de sugerencias, pon la mitad del agua, cuando hierva añade el agar, tarda bastante en disolverse a veces, así que lo puedes dejar un rato en el agua caliente con el fogón apagado, muevelo de vez en cuando, si ves que no se disuelve del todo lo calientas una vez más y cuando hierva lo apagas. Pero no lo dejes en el fuego por largos ratos.

    Una vez disuelto, añade los demas ingredientes y el resto de agua y pasa el brazo eléctrico, así ya te queda un liquido hogéneo y lo puedes manipular sin quemarte.

    Cuando lo pongas en los frascos, pon sólo un centímetro de medio como mucho, para las semillas hasta con medio te basta. Y cuando lo pongas a esterilizar, respeta los tiempos, en olla express no más de 20 minutos.

    Cuando los saques aun un poco calientes, ya cerrados bamboléalos un poco para ligar el medio. Con eso debería bastar, es normal que quede un poco diferenciado y lo que pesa más vaya al fondo, pero así creo que mejorará, ya nos dirás.

    Saludos
     
  11. netpiolin

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola alansolanodiaz,Monstera te ha aconsejado muy bien. Como ella te ha dicho, para la siembra pon solamente 0,5 cm de medio en el frasco, es más que suficiente para que germinen, y queda más homogéneo. Si dices que te queda el medio un poco líquido, es, o bien porque no se te deshecho todo el agar, o bien porque le tienes que añadir un poquito más. Yo antes de esterilizarlo, pruebo con un frasco metiéndolo en el microondas hasta que empieza a hervir, lo remuevo un poco y lo dejo enfriar bien. Si queda bien de consistencia, entonces lo esterilizo en la olla. Si queda muy blando, le añado un poquito de agar, y si queda muy duro, le añado un poco de agua. Para que quede homogéneo el truco está en echar poquito medio de cultivo (0,5 cm) y removerlo justo cuando está empezando a espesar (cuando está semilíquido). Con la práctica le cogerás el tranquillo.
    Espero haberte ayudado
     
  12. alansolanodiaz

    alansolanodiaz Alan

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Olivia, hare lo k me dices, porque revisando bien, quedaron cachos sin disolver de agar agar en los fondos de los frascos. Me encanta la idea que me planteas, muchas gracias Amiga, saludos al lindo angelito k hay en tu casa....

    Netpiolin, tu recomendacion es buena idea, pero se me hace complicado estirilizar uno y poner en espera a los demas, no se empiezan a poner duros los demas frascos?????? Pero sabes me agrada tambien tu proceso, creo k intentare utilizar los dos procedimientos para la mejoria de mis medios.... Muchas gracias Netpiolin.
     
  13. netpiolin

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Los demás frascos claro que se te ponen duros, pero cuando los metes en la olla para esterilizarlos, se vuelven otra vez líquidos. Quizás me expliqué mal. Yo lo hago de la siguiente manera:
    - preparo todo el medio de cultivo en un frasco grande o jarra y lo meto al microondas hasta que hierva y se quede liquido.
    - remuevo bien para mezclarlo y vierto un poco (0,5 cm) en un frasco para hacer una prueba de consistencia(el resto se queda en el frasco/jarra). Como hay poca cantidad,en media hora, mas o menos, ya se ha endurecido y se puede ver el resultado.
    - si el resultado es bueno, lo meto todo de nuevo en el microondas hasta que hierva y lo vierto en todos los frascos.
    - meto los frascos en la olla y los esterilizo.
    No tengas miedo de que se te endurezca el medio antes de esterilizarlo porque se vuelve a quedar líquido cada ver que lo hiervas.
    Espero haberte sacado de dudas
     
  14. osomeone007

    osomeone007 Lino Ferreira

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    hola a todos,

    Me gustaria saber cual es el tiempo médio de germinación de las semillas, en mi caso son cattleyas. Es que já van mas de 2 semanas y no veo nada, ni germinación :( ni contaminación :happy: ......pienso que mi principal problema es la ansiedad:martillo: :martillo: :martillo:

     
  15. orquicultor

    orquicultor

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    osomeone
    fumate un puro pero sigue las indicaciones
    siembra tabaco
    espera a que germinen tus plantas de tabaco
    cuando las hojas sean grandes
    toma un curso en habana
    prepara el tabaco que cosechaste y a la mejor en lo q aprendes y haces el puro ya tienes protocormos
    y despues de dos años a la mejor los sacas a macetas comunales como plantulas
    esa es mi recomendacion para tu cultivo
    y si no fumas vete de pesca pero has tu propia lancha desde la madera
    y si ninguno de estos planes te late
    compra paciencia
    saludos a todos y una sonrisa para el fin de semana
    ramon