Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

mbm, pues a los frascos les hace falta un repique, quitar lo muerto y poner en medio fresco, no se si ex vitro tirarán adelante, no les veo mucha raíz. Cada frasco crece diferente, depende de muchísimos factores, luz, temperatura, lugar geográfico... Si no desarrolla raíces, no consume casi medio. Suerte con ellas

Francesc molt meques les Bletilles...

Luis a cebar la cápsula!!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola, ojalá pudiera llenar la fachada con Broughtonias pero aquí en Galicia no sobrevivirían el primer invierno jeje. Gracias por las felicitaciones pero en verdad soy yo el que tiene que felicitarles a ustedes por el tremendo esfuerzo que hacen para cultivar in vitro de manera artesanal. El cultivo in vitro es mi especialidad, es mi trabajo y es mi vida también. Me fascina ver el entusiasmo y el interés que han mostrado ustedes por esta biotecnología. Han logrado ya el paso número 1 que es la germinación asimbiótica de las semillas de orquídeas. Les animo a continuar con la organogénesis y la embriogénesis somática a partir de hojas y raíces!! Esto es la multiplicación clonal de plantas, nos ayudaría a prescindir de las semillas! No crean que es imposible. Estoy a disposición de ustedes.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Netpiolin, gracias por la informacion.
Parece que me queda aun un poco de tiempo para enterarme de la reproduccion InVitro......

Gracias
Luis

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

holaaa amigos como estaisss , tengo una cambria polinizada ( una sola flor ) , en cuando tiempo tiene que pasar para recojerla en verde
saludos a todosss

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Dakota20, hola como estas? Mira t platico mi experiencia, yo tenia una cambria polinizada, y maduro mas o menos a los 4 meses, pero en una segunda ocacion tardo unos 6 meses y no se porque, ya que ambas capsulas fueron polinizadas con las mismas orquis cambria x oncidium y tardaron diferent tiempo.

Otro ejemplo es que una de mis phal tenia capsula k maduro a los 8 meses y otra a los 5 o sea k es muy variable, y pa no errar en el tiempo de maduracion, he aprendido k es preferible cortar la capsula cuando cambia a color amarillito, antes del marron y esta aldente pa sembrar en verde antes de su apertura.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Alguno de ustedes sabe como hacer para k en los frascos no quede demasiada agua??? Lo que he hecho es cuando abro el frasco, volteo para que salga el agua del mismo, pero cuando echo las semillas y cierro, al siguiente dia amanece con algo de agua nuevamente, y algunas semillas flotan o se pegan con el agua a las orillas del frasco, creen k germinen si estan medio flotando?????? O se pudriran????

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

gracias alan por tu respuesta , las ire vigilando hasta que vea que cambian de color ,

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Alan, con respecto a la acumulación de agua sobre el medio, normalmente esto ocurre cuando hay mucha diferencia de temperatura entre el día y la noche. Si hay más de cuatro grados celsius de diferencia y el medio no tiene una osmolaridad muy alta, el agua que se evapora durante el período de temperatura más alta se condensa en la paredes, escurre y se acumula sobre el medio cuando el frasco enfría. si las semillas están flotando pueden hiperhidratarse y morir, además eso aumenta el riesgo de contaminaciones. Yo te sugiero que mantengas los frascos con los cultivos bajo una temperatura estable. Otra opción es abrirle un agujero a la tapa de los frascos y ponerle en el agujero un pedazo de esponja, pero claro, esto es antes de esterilizar los frascos con medios. Esto permite un mejor intercambio de humedad con el medio externo e impide que haya condensación dentro del frasco.
Espero resuelvas tu problema.
saludos.
yowi

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola yowi2012, ¿Tienes información sobre la embriogénesis somática y la organogénesis? Me interesa ése tema, ya que como has dicho podríamos clonar las plantas que más nos gustasen sin necesidad de semillas. Te agradecería que me explicases sobre éste tema.
Muchas gracias
Un saludo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Alan, para las especies tropicales de tierras bajas la temperatura que mejor me ha funcionado es 28 grados celsius para la germinacion y el mantenimiento. Para las de zonas altas podría también funcionar esa temperatura. Usualmente en cultivo in vitro mantenemos los cultivos bajo fotoperíodo, 16 h de luz y 8 h de oscuridad. Para las especies tropicales la temperatura bajo luz suele ser 26-28 grados y durante la oscuridad 24-26 grados celsius, pero eso depende de la especie.
Yo trabajo a temperatura constante, 28 grados, para evitar la condensación de agua en las paredes de los frascos. Con las orquídeas del caribe me funciona perfectamente.
Abrazos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Netpiolin, hay pocos trabajos sobre organogénesis en orquídeas. Actualmente yo estoy haciendo algunas pruebas con especies caribeñas pero todavía es muy pronto para hablar de resultados. Hay un trabajo con una especie de Oncidium donde pudieron inducir protocormos adventicios a partir de fragmentos de hojas. La cuestión es encontrar la combinación exacta de reguladores de crecimiento que pueda desencadenar la respuesta organogénica. Es difícil, porque hay muchos reguladores de crecimiento (fitohormonas) y las especies responden de manera muy diferente, incluso los tejidos de una misma planta responden de manera diferente. Es como buscar una aguja en un pajar. Cómo pueden probar en sus casas? Existen reguladores de crecimiento que se usan como base de herbicidas comerciales (Dicamba, Tidiazurón, Auxinas). Cuando se adicionan a bajas concentraciones a los medios de cultivo (0,5 - 1 mg/L) pueden inducir una respuesta organogénica en el tejido cultivado. Las hojas y las raíces se desinfectan con lejía comercial 1/5 partes, se lavan con agua estéril y se dividen en pequeños fragmentos. Se colocan sobre el medio de cultivo y se guardan en oscuridad dos o tres meses. Con suerte podrías tener brotes adventicios. Hay que hacer muchas pruebas, combinando los reguladores y variando las concentraciones de cada uno. También hay que probar varios tipos de explantos (Ovarios, Hojas, Raíces) Lo bueno de esto es que la planta madre no hay que sacrificarla y se puede probar todo el tiempo porque no hace falta semillas.
Si te animas a probar cuéntanos tus resultados por favor.
saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra


Estos son embriones somáticos inducidos in vitro a partir de un filamento de estambre de Vid. Estos embriones son copias idénticas uno del otro y de la planta madre también, son clones.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Los medios de cultivo a los que se le añaden las hormonas ¿son los mismos que para la siembra de semillas?
¿Sirve la hormona 6-Benzylaminopurine (BA) para éste método?

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Si, es posible que la BA sea una de las mejores, sobretodo para inducir la brotación de las yemas que están en dormición en los pseudovulbos viejos. Para la organogénesis es más adecuado combinarla con una auxina (AIA, ANA, AOA). Se puede emplear el mismo medio que se emplea para la germinación de las semillas y el mantenimiento de las plantas, pero con la sacarosa a 30-60 g/L, para introducir estrés hídrico, que puede ayudar a iniciar la respuesta organogénica sobretodo en Dendrobium.
saludos