Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

RESPONDIENDO A AINCIOA
Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra
Mi problema eran los gastos de envío, terriblemente caros, pero me dieron una dirección en España que importa estos "medios"

http://catalogo.rodelab.com/Phytotechlab/

Espero que os sirva, aunque Olivia no los aconseja demasiado.

Saludos.
Muy buen link, no esta Ud en mi pais sino ya le enviaba las esporas por DHL
Revise la informacion y vi las formulas
la P668 - Orchid Maintenance Medium
y note unos ingrediente que no aparecen en otras formulas que usamos
ejm; son mg por lto
Boric Acid 3.1
Cobalt Chloride•6H2O 0.0125

El ac borico es muyyyyyyyyy baratp
y el cobalto son partes por millon pero si tiene suma importancia en la fotosintesis mira este link
http://www.tendencias21.net/Una-nueva-investigacion-nos-acerca-a-la-fotosintesis-artificial_a3065.html
El ac borico ya se lo puse a una tanda de frascos que preparare este fin de semana, y hoy mismo consigo una NANOMETRICA CANTIDAD de clorohidrato de cobalto.
Ahhh lo olvidaba
El costo de las formulas que preparo . . . .
no llega por litro ni a $ 30 pesos o sea 2 dls de EE UU
y con eso se pueden llenar unos 30 frascos
Y no uso bascula . . . . ja,aja,aaa

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Carlos, gracias por el tip de hacer el vacio¡¡¡¡

Pero una pregunta mas, que cantidad de agua y azucar utilizas para hidratar las semillas?????

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Me han pasado unas capsulas en verde de Bletilla. Ahora bien, me surgen unas dudas a la hora de ponerme a hacer la germinación in vitro.

- Es una orquídea terrestre, por lo que habrá que comenzar la germinación a oscuras, ¿cierto?

- Al ser terrestre necesitra fórmulas específicas para terrestres, ¿pero podría germinar en la clásica fórmula de plátano y tomate?

- He encontrado dos fórmulas específicas para las terrestres:

Fórmula 1: (está en este post)

40g de patata
20g de carbon activado
10g de agar
500mg de inositol
20g de azucar
1 l de agua de lluvia o destilada
ph 7 a 7.8 alcalino

Respecto a esta fórmula me surge una duda, no tengo carbón activado y no lo voy a encontrar donde vivo, ¿se podría sustituir por carbón de barbacoa?


Fórmula 2: (de la Orquideoteca)

MgSo4 150mg
Kh2Po4 150mg
Ca3Po4 90mg
FeSo4 18mg
Tryptone 3,5-4,0g
Nitsch Vit. 108mg
MES 1g
act. charcoal 1g
Agar 5-6g
sucrose 20g
trozos de patata (10 para 50ml de medio) de patata cortados 5x5x5mm

¿Se podrían sustituir los componentes químicos de esta fórmula por el medio de M&S?

Bueno, cualquier consejo sobre como hacerlo es más que bienvenido. A ver si me pongo ya y me sale bien.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

RESPONDIENDO LA PREGUNTA;
Pero una pregunta mas, que cantidad de agua y azucar utilizas para hidratar las semillas?????

Mira ahi el botecito de plastico transparente son aprox 100 ml
no lo lleno mas que 3 /4 partes esto es para poderlo agitar algunas 3 o 4 veces al dia, la cantidad de azucar esta en la cucharita de cafe
seria aprox unas 4 veces el volumen de las esporas, o sea muyyyyyyyy poquito y una minuscula pizca de una tableta de complejo B.

No creo se pueda poner mas azucar, pues el agua tendria una presion osmotica alta que no favoreceria la hidratacion de las esporas.
Al hidratarse la espora no solo entrara el agua, aprovechara la glucosa y fructuosa del azucar y comienza una serie de cambios bioquimicos para hidratar y comenzar la division y multiplicacion de sus celulas, por eso use una pequeñisima parte de la tableta del complejo B.
LAS DEJO AHI PASANDO MINIMO UNAS 30 HRS

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Carlos
me presento Ramon Orquicultor, creo q le llamas esporas a las semillas y me confundo un poco, si me gustaria que me saques la duda, y por el otro lado las semillas germinadas pasan a ser protocormos.
te felicito por los logros que has tenido en tus siembras.
y si quieres intercambiar semillas aqui ando
saludos a todos

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Estimado Don Ramon Orquicultor
Llamamos semillas a las que tienen endospermo ( la parte que tiene las reservas ejm. almidon, CHO) por ejem una semilla de maiz, o un frijol, las siembras bajo tierra y desarrollan para salir a fotosintetizar
Las esporas no tienen endospermo, para desarrollarse por si solas no tienen reservas(nutrientes, energia) para desarrollar
Yo estoy en Monterrey
Soy el mas novato de los novatos, apenas este Marzo 2012 polinice unas Pal
y para mi asombro, todas las flores polinizadas formaron capsulas.
Si podemos intercambiar, las mandamos en un sobre de celofan por paqueteria y le llega seguro a su destino unas miles de esporas.

Pero le suguiero esperar un mes. Acabo de hacer unos cambios en la formula y en el proceso, tengo unos frascos hasta el FULL de protocormos, pero no en todos se dio, en algunos solo hay uno a tres desarrollando, y un 30 % se va a ir a reproceso(vaciar y volver a llenar) .
El reto y no lo creo imposible, es repetir esas condiciones en todos los frascos y se vean llenos.
Yo les compartire los detalles como lograrlo
Tan pronto pasen estos turbulentos dias en Mex, espero irme de Tour por Veracruz y tal vez pase por el DF

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

gracias x la aclaracion
yo de orquicultor solo el nombre pero hay van germinando mis frascos y ya haciendo desenfrascados, tenia la idea q esporas eran las inmencionables capas blancas de contaminacion (entre otros colores)

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola a todos
Acá un dato que a mi me ayudó a entender sobre todo este tema tan complejo y con el cuál aún no experimento del todo, cito dos notas:

"Por otra parte, las semillas de las orquídeas son tan pequeñas que contienen
poca o ninguna reserva para llevar a cabo la germinación, es decir, no
presentan endospermo, por lo que en condiciones naturales se asocian con
hongos que digieren la materia orgánica y transfieren los carbohidratos al
embrión de la orquídea, permitiendo que se desarrolle la planta. Además,
requieren los polinizadores específicos para que se efectúe la fecundación. La
sumatoria de estos factores hace que el número de semillas que germinan en
condiciones naturales sea muy bajo en comparación con el número de
semillas producido (Abdelnour y Muñoz, 1997)."

y en otro dice:
"Las esporas no son semillas. Una semilla contiene una forma pequeña de una planta y comida para ayudarle empezar a crecer, todo envuelto en un caparazón duro. Una semilla está compuesta de muchas células.
La mayoría de las esporas están compuestas de una sola cédula y protegidas por la pared celular. Algunas esporas están hechas de muchas células, pero la espora mas grande es mas pequeña que la semilla mas chica (producida por las orquídeas)"
http://herbarium.usu.edu/fungi/funfacts/spanish/PilbsporSP.htm

Por lo tanto las esporas como las semillas son medios de reproducción de algunas plantas, las orquídeas producen semillas, los hongos y helechos si se reproducen por esporas
por eso Orquicultor asoció los hongos que salen al contaminarse los frascos con esporas y Carlos H asoció el tamaño minúsculo de las semillas de orquídea con esporas o no ???

Saludos

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Gracias Daysi
y seguire en la ignorancia, pero eso si con muchisimos frascos con protocrmos y algunos ya con plantulas de orquideas.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

alguien podria decirme donde consigo agar agar en leon de los aldama guanajuato mexico

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Aki les dejo fotitos de mis invitro que han sidi exitosos, no se cuanto tiempo llevan, pero la neta estoy muy orgulloso, porque pense que jamas lo lograria, pero despues de prueba y error van muy bien, solo que demasiado lento.







Este ultimo, el medio de cultivo que utilice fue abono 20-20-20, azucar, agar, y benerva.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Muchas felicitaciones Alancitop por avances alcanzados. le dan ganas de seguir intentando.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

alguien podria decirme donde consigo agar agar en leon de los aldama guanajuato mexico

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Chiquillo, yo soy de España y no sé, pero prueba en las farmacias, en las tiendas de comida para vegetarianos y en la de comida china. En estas últimas lo venden en rama, muy barato. Si no lo encuentas, me lo dice...

Un cordial saludo.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

igual y como te recomiendan lo buscas es esas tiendas de productos orientales (chinos) y preguntas por gelatina vegetal o de alga, diferente a la grenetina de repostería y que es de origen animal