Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Con respecto a que el medio debería costar como 40 pesos, creo que es demasiado barato, ni siquiera llega al costo de 10 g de agar bacteriológico aprobado para cultivo de tejidos vegetales, 500 g cuestan 2207 pesos más iva, a menos que sea un agar con una pureza menor al 50% y que nunca se ha probado para cultivo in vitro.

La compañía Sigma-Aldrich vende el medio MS completo en todo el mundo , un litro por 171 pesos más iva, y su costo en USA es su equivalente en dólares, no se si estén estafando a todo el mundo vendiendoles espejitos.

Bueno, con respecto a la formulación que das del medio, el que vende Sigma no contiene los reguladores del crecimiento IAA y Kinetina, ni edamine.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Carlos, gracias por el consejo, la verdad intentare limpiarlos con cloro y agua y despues si siguen con el hongo, optare por tu método, la verdad es que yo estaba feliz, porque eran los primeros que lograban su sano crecimiento, pero fue cuestion de que hice repique y valio madres... Perdon la expresión pero asi fue literal¡¡¡¡

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Acourtia, y como podríamos comprar el medio, hay alguna pagina o lugar en México donde podamos conseguirlo o comprarlo??? Muchas gracias, tu dato nos serviría de mucho en este post¡¡¡

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Carlos H! soy nuevo en el foro, y aunque hasta hace 1/2 semana consegui el agar en el centro de venta japones en CD de México, ya he preparado hace 2 años con grenetina un cultivo pero pasaron como 6 mesen y nada de nada, quiciera saber cuanto tiempo tardan para evolucionar desde semillas casi invisibles hasta plantulas de el tamaño que muestras!!

pd. use formula del tomate expuesta por Montsera, tu que medio me sugieres???

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Los protocormos del frasco tenian como 4 meses, fueron sembrados en julio 2012 de una capsula polinizada en marzo 2012, no fue uniforme la germinacion en unos frascos habia 3 otros 300, otro nada. Repeti en fechas posteriores y no se pudo igualar condiciones . .. fui descartando una falla tras otra
al final concluyo;
1-vieron que habia abundantes semillas y se fueron al fondo del agua? ok
2-No las quemen con la lejia, 4 partes de agua y una de cloralex por 10 minutos esta bien, previo reposo 24 -30 hrs en agua con poquito azucar. las lavas bien lavadas unos 3-4enjuages con agua esteril
3- el medio no debe ser aguado, o jamas veran ni una sola salir, debe ser mas semi solido
4- la formula del tomate funciona, solo escoje tomates bien ROJOS Y SANOS, PURA CALIDAD si consigues unos que pesen medio kg cada uno mejor, solo cortas los 150 grs, si pagas el triple no importa, si te tardar una semana en comprarlos no importa.
5- Busca el fertilizante triple 17, fijate que tenga Mg 2 %. calcula un medio gramo es menos de la punta de una cucharita de cafe, . se batalla para disolverlo, muelelo y disuelvelo en el agua un dia antes, es aprox. medio gramo para un Lto

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Gracia carlos te agradesco, voy a experimentar nuevamente, esta vez con agar y no quemarlas lo cloro, que las desinfecto como 3hr !! a solo 10 mins!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola carlos, denuevo te muestro los que hice hace un par de semanas, un frasco con semillas de gongora galeata hasta ahora ningun cambio, cabe decirte que es el medio de grenetina y en cuanto a la rigidez de esta no hay queja contiene ademaz la formula de la banana:

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

desinfecto como 3hr !! a solo 10 mins!!
Lo sorprendente habria sido que germinaran
No se preocupe, la gran mayoria hemos cometido fallas iguales o aun peores.
Lo que cuenta es que no se desanimen

Los frascos que sembraste hace 15 dias, es bien poco para ver algo
pero si tienen un lente de aumento minimo 4x o 4 pulgadas de diam.
podras observar en las primeras horas de la mañana o las ultimas de la tarde con la luz del sol al extremo opuesto, con el lente tal vez puedas ver a las semillas que ya se hidrataron pequeñisimos puntos sin color que sobresalen en la superficie.
Esperemos ver nuestros protocormos algun dia floreando como adultas

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Alan, el medio lo puedes pedir por medio de un distribuidor de reactivos, no lo venden al publico directamente, yo lo preparo a partir de pesar cada uno de sus componentes. La calidad del agar es clave, con los 7-9 g/L el medio no queda aguado o muy sólido, los agares de dudosa calidad tienen inhibidores del crecimiento.

Aprovecho para mostrarles un frasco con esporas de helecho ya germinadas, algunas esporas se fueron a la parte baja del frasco y aún así germinaron y están creciendo.

https://***/a/img196/728/dsc02641g.jpg

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Jajajaja lo mejor y lo peor de desinfectarlas mucho tiempo es que nada crece en su interior, ni bacterias, ni orquideas!!!

GRACIAS POR EL DATO!!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Muchas gracias Acourtia, que tengas lindo dia¡¡¡

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

buenas a todos tenia tiempo sin entrar al foro bueno alguno de ustedes a experimentado con cultivo in vitro de explantes como raíces jóvenes de orquídeas y si tiene algun procedimiento diferente al del cultivo con semillas

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola malfurion, pues t comento k solo he leido k solo puedes clonarlas x explantes,ya sea d nuevos bulbos bebes o d baras d phal, y el procddimiento con raices, creo k en algun lado lo llegue a ver, pero jamas lei k diera resultado y nunca he leido o encontrado informacion al respecto, te recomiendo k solo intentes x ahora con semillas, xq con explantes s mucho mas complicado y estricto el procedimiento. Saludos amigo!!!

 

Hola, ¿Alguien ha probado estos filtros? http://www.ptfefiltervents.com/ por lo que he leído el intercambio gaseoso de las plántulas acelera el crecimiento de las mismas y a su vez tienes un crecimiento mas uniforme.. No dudo de la información recabada pero ¿Es verdaderamente notable esto? Lo pregunto por que estos filtros son bastante caros, también leí que se puede utilizar Micropore 3m en 3 capas pero no es autoclavable así que tendría que desinfectarlo de otra manera y que rollo.. ¿Alguien con experiencia en el tema de intercambio gaseoso en micropropagación que me instruya?

Saludos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola a todos, les comento que por fin funcionaron mis siembras con semillas de capsulas abiertas, nunca antes lo habia logrado, ya estan verdes y se ven como van engrosando, en un mes les subo fotos, mientras tanto me ausentare un buen rato del foro por cuestiones de trabajo, pero en cuanto pueda les subo fotos. Saludos a todos¡¡¡¡