Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Vas por muy buen camino!
Para repique yo uso P668 con 80 gr/l de banana.
Cuentanos como te va con los repiques.
Eliseo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola forer@s
Estoy haciendo mis primeros pinitos en esto de la germinación in vitro.
La verdad es que soy bastante novata y casi todo lo he aprendido de este foro, en concreto de este post (aunque no he podido leerlo entero ). En fin este es mi primer in vitro



Se que apenas se ve nada,pero creo que hay un par de pequeñisimos protocormos (y eso después de dos meses). Creo que el problema es que planté demasiado en verde.
Pero aun así estoy muy orgullosa.


El caso es que un forero muy amable ha tenido a bien enviarme una semillas, y dado que yo nunca he plantado semillas que no estén en verde me gustaría saber si sería conveniente tenerlas en remojo en agua con azúcar como he leído en algún que otro sitio.

También quería hacer otra pregunta y es que en el cultivo que ya he hecho debajo de los protocormos aparece una mancha marrón no se si esto es malo y debería repicar o no es nada y lo dejo estar.
Muchas gracias a todos y en especial a Monstera por esta maravilla de post.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola,

Os muestro mi tarro de invitro, se sembraron en agosto. Creo que el medio es un poco espeso y las raices no pueden atravesarlo. Las paso a otro medio un poco más líquido?

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola: mejor déjalo hasta el abril, ya que ahora poco o nada crecen. Un saludo.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

oK, gracias!!

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Buenos dias a todos, despues de leer todo el tema,
me he animado a hacer el invitro pero me falta lo principal.
Me faltan las semillas, si hay un alma caritativa en el foro
a la que le sobren semillas de phalaenopsis o cymbidium,
que es con lo que quiero empezar, estare agradecido si pudieran enviarme unas cuantas.
Muchas gracias

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Vegetalia, las manchas marrones suelen ser exudaciones fenolicas, aunque siendo protocormos creo que no es normal una exudacion tan prematura, no se, esperemos una respuesta de los expertos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Arcangell, esos botes se ven muy muy bien, enhorabuena.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Buenas tardes,
Les comparto unas fotos de nuestros frascos.
Empezamos tímidamente hace algunos años, como mucha gente de este hilo, y vamos progresando muy rápido... aunque nos falta mucho por aprender!

Parte de nuestra cámara de crecimiento, esta es la refrigerada:


Phragmipedium lindenii


Phrag longifolium x besseae


Phrag besseae x andreettae


Phrag Green Hornet (longifolium x pearcei)


Phrag Sedeni (longifolium X schlimii)


Phrag wallisii


Phrag kovachii mother flask


Phrag kovachii replate flask


Híbrido de Cattleya


Cattleyas recuperadas tras tratamiento de poliploidía (conversión a 4N)


Espero les guste!
Eliseo

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Eliseo, ¿qué medio usas para los prag.? Se ven muy grandes.
El tratamiento de poliploídia,¿lo has hecho con colchicina?

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Nos ha costado mucho conseguir el medio adecuado para phrags pero ya estamos cerca de un medio ideal. No todos tienen los mismos requerimientos hay especies que lo requieren muy diluido y otras que lo necesitan a mayor concentración. La base es MS rebajando la concentración a 1/2 aprox. luego puedes usar diferentes aditivos, coco, banana, piña, patata... en general MS a 1/2 más banana funciona bien. Puedes empezar por ahí y mirar como responden las plantulas.

Para poliploidía no usamos colchicina porque es demasiado tóxico y de efectividad limitada. Usamos oryzalina que no tiene mucho problema de toxicidad para el personal de laboratorio y parece ser más efectiva que la colchicina.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Madre mía Eliseo!
Que maravilla!
También le he echado un ojo a tu página y me encantaría estar más cerca para poder comprarte algunas plántulas en frascos, que barbaridad esa vanda luzónica
Me acabo de enamorar.
Algún día caerá en mis manosJejeje. Y algún día nos frascos tendrán cierto parecido a los tuyos.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Hola Vegetalia muchas gracias.
Tal vez tengas suerte con la luzonica... espara un par de meses, yo te aviso.
Estoy seguro que tus frascos van a parecerse o incluso superar los míos. es cuestión de práctica, paciencia y observación.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

SALUDOS:

Pues en vista de que mi prost. baculus y mi epi. radicans me regalaron semillas y no encuentro que hacer con ellas, (y al parecer nadie las quiere) pues vere si me aviento un invitro.
Tengo entrenamiento en microbiología, he preparado medios de cultivo tipo agar-sangre, saburout, agar simple y cosas asi; he realizado siembra de mo por inoculación y cosas asi, cultivos liquidos.
Segun yo eso es como medio complicado, las autoclaves para esterilizar los medios de cultivo, la incubadora (para las cajas de petri) creo lo mas sencillo es el area de seguridad entre los mecheros.

Ahora mis preguntas, cuando hacen invitro caseros de verdad tienen eso en casa, que medios ocupan para los invitro, como resuelven la onda la incubadora, y sobre todo cuanto cuesta, montarme eso en casa ???

(precios de méxico de ser posible, edo de mex si no es mucho pedir)

ojala me ayuden o ya de plano tomen mis semillas y haganlo ustedes, tengo semillas de prostachea baculus y de epidendrum radicans.

ojala puedan ayudarme.

 

Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

Puedes empezar sin mucho equipamiento.
No necesitas incubadora y el autoclave no es más que una olla a presión...
Un laboratorio decente cuesta unos cuantos miles de dólares pero para empezar lo único que se necesita es paciencia.
Al principio puedes consturir una cámara de siembra con una pecera o incluso con una caja de cartón... o trabajar en el horno.. hay muchas opciones.
Trata de empezar con lo mínimo sin hacer inversión para ver si realmente estás dispuesto a invertir el tiempo necesario. Cuando ya estés convencido puedes fabricarte una cabina de flujo laminar y el resto de equipamiento que hace el trabajo más cómodo.
Saludos