Mis experiencias In-Vitro. Creo que odio al Reino Fungi :(

Discussion in 'Multiplicar orquídeas. Semillas. Keikis. In vitro' started by matrinxd, Feb 1, 2016.

  1. marqdiego

    marqdiego Diego.

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    Eso mismo me paso a mi pero como están calientes durante bastante rato hago eso de ir moviéndolos un poco para que se quede todo homogéneo.
    Y el plátano trate de dejarlo lo mas liquido posible.

    Yo quiero construirme una glove box para sembrar con algo mas de cuidado. Hasta ahora solo he trabajado en torno a un mechero y solo se me ha contaminado un bote. Muy a mi pesar de las semillas de bellatulum, quedándome solo uno que de momento se salva de contaminación.

    Se que existen soluciones antibióticas para evitar el crecimiento de gran numero de microbios en cultivo in vitro porque los he llegado a usar en microbiología pero ahora no recuerdo nombres exactos. Dudo que a dosis controladas iniva el crecimiento de protocormos y quizás ayuda a que si alguna espora o bacteria germina, esta no consiga desarrollarse. Sobre todo en los repiques que es mas fácil que todo se contamine.
    Buscare sobre el tema y lo que saque en claro lo comparto.

    Saludos!
     
  2. matrinxd

    matrinxd

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    Vale, muchas gracias, antes que se solidifique el medio: meno ^_^ :angelito:
     
  3. matrinxd

    matrinxd

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    Es muy fácil y barato hacerse una glove box. Ya veo la suerte que tienes por tan pocas contaminaciones, yo todo lo contrario. De las soluciones, digamos antibióticas te podrá hablar Jose, yo lo único que te puedo decir es que probé con Botrybel en el in vitro, el problema que tengo en casa desde el otoño pasado es muy serio; ya he dejado de llevar la cuenta de las plantas perdidas a causa de los hongos:cry: tanto in vitro como ex vitro. http://www.labarracademaria.com/product/botrybel-100-cc-probelte/ Si eres de Albal la tienes cerca en la avenida del Puerto. A mi con los rosales me ha ido fenomenal y en el in vitro cerré dos botes echándole un puf con la disolución. Éste bacilo se come a los fungis fito patógenos. De perdidos al río, o sea que, por probar...
    :icon_redface:
     
  4. Lms_16

    Lms_16

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    Alguien sabe si hay alguna forma efectiva de germinar bletilla striata de modo simbiótico?? Gracias
     
  5. marqdiego

    marqdiego Diego.

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    He estado mirando y existe una mezcla antifungica y antibacteriana conocida como PPM(plant preservative mixture) que se utiliza en el cultivo in vitro de plantas para disminuir la tasa de contaminación, sobre todo cuando se trabaja sin cámara de flujo, etc.
    Sé que existen mas sustancias que usadas a concentraciones apropiadas no llegan a afectar el cultivo de plantas, y si que consiguen impedir el desarrollo de esporas, bacterias u hongos. Pero yo creo que para nosotros lo mejor es afinar la técnica de siembra intentando ser lo más asépticos posible.

    En tu caso @matrinxd puede que a pesar de que has tomado todo tipo de precaución(el delantal es de lo mas divertido que he visto:11risotada:), hay algo que es lo que está generando la contaminación.
    Yo repasaría bien los pasos y ver donde puede estar el fallo.
    Por poner solo un ejemplo, cuando se preparan en laboratorios los viales con los medios y se guardan en nevera bien precintados, al llevarlos a la cabina se rocía todo bien con etanol de 70, se limpian bien en torno a la tapa incluso mas de una vez ya que aunque este estéril por dentro, por fuera no lo está, y al abrirlo para hacer la siembra cualquier cosa puede caer dentro. Parece algo obvio pero que es muy fácil descuidar o pasar por alto, y es de lo que genera en laboratorios mas indices de contaminación.
    Lo mismo pasa con la jeringuilla con la que esterilizar las semillas, así a modo extremo, aunque uses una estéril nueva, en cuanto la abres para aspirar la lejía, lavar con el agua estéril, etc, estará desinfectada por dentro pero no por fuera y es algo que pondrás en contacto con el vial a la hora de la siembra. En este caso lo que hago es también con el spray de etanol de 70, rociar las jeringuillas. O con lejía diluida también se puede.

    Es solo un ejemplo, pero lo que intento decir es eso, repasar en que paso se puede estar descuidando una posible contaminación, y afinar, corregir. Seguramente con ello si se contaminaban 6 botes, con que se pase a contaminar solo 3 ya habrá valido la pena jaja.

    Saludo y buen crecimiento a todos!!!
     
  6. jose

    jose

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    Pues yo buscando solo he encontrado el PPM pero es muy caro asi que no creo que valga la pena
    Pienso lo mismo que los demas ,lo mejor es buscar el paso en el que se contaminan
    Posdata en acabar los examenes volvere a escribir
     
  7. matrinxd

    matrinxd

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    Las he vuelto a desinfectar. ésta vez he impregnado la cámara con alcohol de 96º y puestas las herramienta también en el mismo desinfectante. Antes de abrir los botes otra vuelta a pulverizar alcohol pero de 70º y la cámara que tiene tres velocidades a toda marcha al destapar. He utilizado el Amocuar de Todorquídea y espero que no sea muy agresivo, ya os contaré. A pesar de todo estoy muy conforme con lo obtenido pues en la glove box tenía que repicar y desinfectar casi todos los días. Mañana subiré las fotos de lo hecho hoy, pues ya no me da tiempo, acabo de terminar. Un abrazote inmenso, tesoret's :beso:

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