Darlingtonias in vitro

Bueno pues primer intento de in vitro:

Medio de cultivo:

1. 1L Agua destilada
2. 1mL solución BAP: Giberelina
3. 1mL solución PPM tebuconazol
4. 30 gr de sacarosa (o azúcar)
5. 3 gr de medio Murashige & Skoog
6. 7-8 gr de agar agar (gelificante)

Las primeras bombillas no han superado el autoclave (olla rápida con el separador para cocer al vapor) así que trabajado con cuidado el medio (bien hervido y cerrado en caliente)

Desinfectadas las semillas con Etanol al 96%, peroxido de hidrógeno al 3% y lejia al 15%



4 semillas por bombilla



Estoy esperando otros recipientes que espero que aguanten el autoclave y vendrá la segunda parte

De todas maneras hasta donde lo he entendido en una semana se sabe perfectamente si está el medio contaminado


Imagen de las bombillas sacadas del autoclave

 

Fantastico @Pablozgz30, y el frasco "de bombilla" más que original...

pues te agradecería que pusieras imagenes, me interesa probar con otros frascos...

Con las temperaturas que tenemos, en siete u ocho días veras si hay o no crecimiento de patogenos, para estar seguros

Aunque es habitual ese periodo, no quiere decir que no aparezca contaminacion mas allá de él, por diversas causas.

Otra causa de perdida del cultivo se puede producir por la degradación en el medio de cultivo, por los restos de los agentes desinfectantes que terminan descomponiéndolo.

Espero que tengas un cultivo exitoso...

 

Impresionado me quedado !!
La cantidad de cosas que se aprenden aquí !!

 

Olé Pablo , me encanta el in vitro. Es fantástico ver crecer plantas dentro de un bote.
Mucha suerte en tu proyecto, ves actualizándolo plis plis.

 

Bueno. Me han llegado los nuevos recipientes para in vitro, pero estos tampoco van a resistir el paso por la olla rápida



Pero tengo otro sistema para desinfección en la cabeza. Lampara de UVC con ozono, tengo que prepararme una caja de trabajo (camara de esterilización) en que tenga un par de dias libres



Ojo con el Ozono que es toxico y hay que ventilar media hora mínimo después del uso (por si alguien se quiere copiar)y la luz UVC quema ojos, piel, retina. Le pondré un relé compatible con google home y la encenderé y apagaré desde otra habitación.

En que tenga algo preparado pego fotos que parece que gusta este hilo.

 

Que casualidad por donde he encontrado yo un globebox

https://www.tecnopica.com/2018/07/03/glovebox-v-01-casera/

 

Le he echado un vistazo al enlace que pusiste y me quedé con la boca abierta viendo la web de Tecnopica.

RECOMENDADÍSIMA

 

Gracias por tu visita...

Si te interesa, te recomiendo mires la versión 2, a ver que te parece, es la que uso en la actualidad:

https://www.tecnopica.com/2018/12/28/glovebox-v-2-0-0/

Gracias @xurde, celebro que te guste...

 

@Pablozgz30 , los frascos tiene que ser de cristal o de polipropileno, con tapa metálica o de PP5 (Polipropileno de alta densidad)

Yo uso unos que compre a Orquideas Almería, seguro que ha Melilla te puede mandar.

http://www.orquideasalmeria.es/BOTES-Y-TAPADERAS-c2_4_2.htm

También le compre tapas sueltas, del tipo yogourt y phytocap, que adapto a mi inmensa coleccion de frascos de mayonesa, por ejemplo...

He usado también tarrinas de pp5, que compro en mayor cantidad a esta tienda:

https://www.juvasa.com/es/93/tarrinas-de-plastico/265/tarrina-280-ml

 

A ver las primeras novedades.

De momento no se ve contaminación y van 5 dias, lo que si se ve es evolución en las semillas (Que ilusión me hace, en serio)

Os pego la foto que mejor he conseguido hacer

 

Se pone interesante el tema

 

Cruzando dedos!!!

 

¡¡¡ Aguanta @Pablozgz30, aguanta !!! ...

 

Suerte Pablo! Es algo que tengo pendiente de hacer desde hace tiempo. Con esa foto tienes la muestra de que de momento el cultivo va sobre ruedas. Ánimo!

 

De momento 3 de las 6 están contaminadas, otra tengo alguna duda y de momento las otras dos no dan ninguna muestra de contaminación. Pero no tengo muchas esperanzas

En una o dos semanas empezaré la versión 2.0, con globebox