Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por Monstera, 3/4/08.

  1. Manzano2008

    Manzano2008 Juan Gómez Manzano

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Alan, el medio que he utilizado es el casero: banana, tomate, agar agar, agua destilada, tiamina, azucar, en las dosis explicadas en este foro, por eso quele debo mucho a este hilo.
    Saludos de Perú.
     
  2. aincioa

    aincioa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Aquí en la zona norte de España es imposible encontrar semillas de orquídeas ni este tipo de plantas en flor en parques o en la naturaleza.

    He estado investigando en foros ingleses sobre comprar semillas en ebay y no dicen que la cosa salga mal, pero tampoco bien. Concretamente del vendedor kumpol_p (ahora mismo tiene 66 especies diferentes a 3,98 y 4,77€ las 1000 semillas) que también se dedica a realizar siembras in vitro. El problema es que yo sólo conozco las orquídeas comerciales, no esas especies "raras". Además mi casa es fría, seca y poco soleada: tiene orientación norte y es planta baja, por lo que no soy capaz de cultivar con éxito cualquier especie.

    Mi idea es estudiar un poco y pedir unas pocas a esos 4-5€ el "paquete" a kumpol_p y sembrarlas antes de que bajen mucho las temperaturas (otro problema en estas latitudes).

    He polinizado varias phal con "buenos resultados"pero no logro que germinen. Algo he leído de que las semillas pueden no ser viables pero nadie me ha asegurado que sea así.

    En fin, dos veces me han mandado semillas de este foro con resultados pobres en cuanto a germinación y nefastos en cuanto a cultivo.
    La pena es que soy casi infalible preparando frascos. Ahora mismo tengo quince, todos sin contaminación desde hace un mes, con el medio ni líquido ni muy duro. Vamos, un hotel de lujo para las semillas. Pero no tengo semillas.

    Saludos.
     
  3. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Creo tengo suerte de principiante:52aleluya:
    [​IMG]
    y este otro
    [​IMG]
    un frasco de 45 dias pero ese grupo de frasocos tenian esporas
    pero solo desarrollaron una pocas por cada cientos
    [​IMG]

    Y se logro esto con equipo muyyyy minimo
    [​IMG]
    nada de camara de flujo laminar
    nada de focos fluorecentes , solo luz natural
     
  4. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    La luz natural aqui pondre todos los frascos
    solo que voy a hacer mas anaqueles
    [​IMG]

    Nunca habia polinizado Orquidea alguna, solo abri con un bisturi una flor
    y vi sus partes masculina y fem, pero al polinizar lo hice con diferente planta intercambiando sus Polen respectivos. Todas las que polinice formaron capsulas
    [​IMG]
    [​IMG]
    y aparentemente daban esporas fertiles
    [​IMG]
    Mas luego vi . . .
    que si a un frasco le entran 50 o 100 esporas . . .
    por que solo desarrollan 1 o 2 ??
    si es el mismo frasco, medio de cultivo y condiciones??
     
  5. Alancitop

    Alancitop

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Carlos, felicidades con tu experimento, pero tengo unas pregunta, hiciste la siembra con semillas maduras y la capsula abierta, o con la capsula en verde sin abrir??? y a que temperatura las tienes en la localidad donde vives????? De verdad que si tienes mucha suerte, porque yo he hecho varios y han fallado!!! Me gustaria que nos contaras a todos mas o menos a mayor detalle el procedimiento que llevaste a cabo, saludos amigo.
     
  6. Alancitop

    Alancitop

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    A ok gracias amigo, la verdad es qur yo no he tenido tanta suerte pero espero y pronto progresen....
     
  7. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    De ahi la pregunta . .. por que si entraron 100 esporas o mas
    solo desarrollaron 1 o 3 o en algunos frascos ni una??
    [​IMG]
    y asi salio esa tanda de frasco, Yo prepare grupos de 10 frascos
    y los 10 fueron similares en resultado, hay desarrollo pero 1 -2 o 3
    y en algunos frascos . .. nada:sorprendido:
    Pero en otra tanda de frascos hecho con otra capsula proveniente de otra
    planta y de otra cruza . . . la viabilidad es masiva:eyey:
    [​IMG]

    De algunas observaciones he sacado conclusiones
    que les compartire a la brevedad posible
    Pues muchos se han desanimado al no ver un resultado
    Cuando las aparentes esporas fertiles pudieron provenir de unas plantas hibridas tetraploides o sea una gran cantidad no eran fertiles o todas .
     
  8. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Sr. Alan

    Contestando a su pregunta, que capsulas use
    mira esta tiene 4 capsulas verdes, bien grandes polinizadas en primeros dias de marzo 2012
    [​IMG]
    esaa planta tenia 4 capsulas biennn grandes y desarolladas
    pero asi las deje madurar llegar a su etapa final en la planta
    [​IMG]
    y cuando abren . . . abren muy rapido
    Yo las veo a diario antes de salir a trabajar y las veo cerradas bien cerradas
    pero al llegar a las 2 PM escasas 5 horas despues me topo que abrio.
    Pero eso es su proceso natural, me arriesgue a perder tal vez algunos cientos de esporas, pero la gran mayoria las recupere y con la certeza que llegaron a su madures.
    Luego sigue la hidratacion 24-30 hrs y despues lavar con lejia
     
  9. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Ahh lo olvidaba . . .
    Yo vivo en Monterrey
    en el lado norte o lado sombra del cerro de la silla
    Monterrey es una ciudad de clima extremo y la mayor parte del año muy calido
    mas de 30 C , 35-36 es la media este mes de julio y agosto
    Yo tengo mis orquideas dentro de una Bodega de materiales y herramientas bajo un traga luz con luz natural, una solo se desarrollo en un medio con clima controlado ( Yo la mande en prestamo a una oficina)
    Monterrey es un desafio para los aficionados a la jardineria
    lo mas dañino es su aire seco, la baja humedad relativa, pero . . .
    Aqui como no es Tierra de orquideas las mias estan practicamente en un santuario aqui no tienen enemigos o plagas que en otra parte si tienen o las acechan.:eyey:
     
  10. Alancitop

    Alancitop

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    No pues tienes una excelente temperatura Carlos, y hablame de tu, aun soy joven, tengo 26 años jajajaja!!!

    Y bueno, te cuento que no siempre las semillas, van a germinar por completo, hay ocasiones en que se hidrataron demasiado o se quemaron con el cloro, o definitivamente son esteriles, son muchos factores, la falta de fertilizacion, durante el crecimiento de la capsula etc, demasiada agua en el medio de cultivo, bueno te podria decir miles y miles, pero como dices es cuestion de suerte.

    Y bueno por ejemplo como pusiste a hidratarlas y con que solucion, y cuanto tiempo las desinfectaste con lejia????? si gustas me puedes encontrar en facebook con mi direccion de correo o como alan sodi, e igual podemos chatear.
     
  11. Loborios

    Loborios

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola, Carlos:

    Ya te dieron varias opiniones, muchas acertadas, de por qué no germinan más que unas pocas semillas de entre cientos.
    Mi experiencia: si las siembras en P-6668 de Sigma, germinaran casi todas, siempre que sean fértiles. Un saludo.
     
  12. Alancitop

    Alancitop

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Carlos de nuevo

    Mira, acabo de leer, que las semillas no siempre germinan, por la falta de embrion al centro de la misma, y que al hidratarlas con azucar y agua,las semillas que tienen embrion, se inchan y tienden a bajar en la solucion acuosa, y las que no tienen embrios, simplemente flotan, y son las que son infertiles, pero para mayor explicacion te dejo la informacion que tiene Nuestra amigaMonstera en su blog: http://orquideoteca.blogspot.mx/2009/08/semillas-de-orquidea-vistas-traves-del.html leelo y veras el porque y tambien dice que a veces las capsulas en la misma planta, tienden a ser diferentes al igaul que su fertilidad.

    Hola Loborios

    Una preguntota amiga, tu de donde eres???? porque se que los medios de Cultivo como el que mencionas son carisimos, porque aki en México, una solucion para un litro cuesta mas o menos unos 700 pesos, (50 dolares)(37 Euros), me imagno que tu la consigues mas barata¡¡¡¡
     
  13. aincioa

    aincioa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Mi problema eran los gastos de envío, terriblemente caros, pero me dieron una dirección en España que importa estos "medios"

    http://catalogo.rodelab.com/Phytotechlab/

    Espero que os sirva, aunque Olivia no los aconseja demasiado.

    Saludos.
     
  14. Loborios

    Loborios

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola, Alancitop.. Vivo en España. El medio puedes comprarlo en Ebay.com, a un precio muy razonable. Un saludo.
     
  15. CARLOS_H

    CARLOS_H

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    RESPONDIENDO A ALAN
    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra
    Hola Carlos de nuevo

    Mira, acabo de leer, que las semillas no siempre germinan, ...
    http://www.microsoft.com/isapi/redir.dll?prd=ie&ar=hotmail

    El link que me indico, ha servido bastante ahi trae un comentario bastante bueno;
    La testa de algunas semillas es muy resistente y por eso es necesario debilitarla con sustancias como la lejía, si no el embrión sólo crece lo que le permite la testa, sin llegar a romperla, dando la impresión de que no han germinado.
    Yo observe ese dato en un frasco que se me contamino y lo abri tengo un lente de aumento y observe que a los 15-20 dias una gran mayoria de las esporas tenian un ligerisimo color verde, admito ver eso es mas un acto de fe. Pero si es muy valido ese parrafo de el link que nos explica la resistencia de la testa y aveces las microscopicas burbujas de aire que para sacarlas explica debemos hacer vacio, es decir en una jeringa cerrada forzar al embolo a salir, al bajar la presion las micro burbujas van a REVENTAR.
    Cuantas veces no se contamina un frasco y creemos que fue el tiempo de esterilizacion, o nuestro manejo. Pero los que estamos haciendo cambios con un grupo de frascos ejm 10 mas buscamos algun factor en comun que paso con ese grupo donde aparecio ese incidente masivo (mas de la mitad) de frascos.