Cultivo in vitro de orquídeas. Preparación del medio y siembra

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por Monstera, 3/4/08.

  1. betofesa

    betofesa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola, alguien me puede hechar la mano? Estoy empezando en esto de cultivo in vitro pero me problema viene a la hora de esterilizar en la olla de presión, por ahora solo preparo medio litro de medio por lo que agrego 5g de agar (en polvo) al momento de prepararlo tiene una pinta excelente y apenas se enfria se solidifica del todo, pero cuando saco de la olla de presión el medio sale líquido y conforme va enfriando ya no solidifica, se me queda en estado como si fuera miel y ya no se que hacer por favor ayudenme.
     
  2. luak

    luak

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Buenas AlexAng, si lees los primeros mensajes de este post de Monstera, veras que se puede hacer en casa sin demasiada complicación de forma casera; medios caseros, esterilizacion en olla y demas.
    Y respecto a las semillas si aún te quedan yo estaría interesado, si quieres hacemos un intercambio, saludos.
     
  3. luak

    luak

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Betofesa, dinos la temperatura y el tiempo a la que sometes los botes en la olla.
     
  4. betofesa

    betofesa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    La temperatura no la se, utilizó una olla de presión convencional, a partir de que empieza a "sonar" le pongo la válvula y la dejo 20 min, la primera vez que lo hice los deje escasos 10 min y ocurrió lo mismo, en esta segunda ocasión agregue más agar y ahora si los deje 20 min y de nueva cuenta queda como miel :(
     
  5. vegetalia

    vegetalia

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola betofesa
    Yo recientemente he tenido una experiencia similar a la tuya y los medios que preparé antes no tuve ese problema, lo que cambie es que en los primeros cultivos eché todos los ingredientes y en vez de cuajar el agar y después a la olla, lo metí en la olla directamente y no tuve nunca ese problema, eso sí la pared de la botes sale muy manchada y no se ve bien lo que hay dentro, pero cuaja muy bien.
    Creo que el problema es que el agar se vuelva a solidificar una segunda vez.
    Pero soy muy novata solo he hecho esto 3 o 4 veces, así que a ver si alguien nos resuelve la duda. ..
     
  6. eliseoteson

    eliseoteson

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola Betofesa, en primer lugar, 5 gramos de agar me parece poquito (aunque depende del tipo de agar) yo utilizo entre 5 y 8 dependiendo del tipo de cultivo pero un buen número podría ser de 7gr/l. El truco es no dejar enfriar nunca el agar para que cuaje una sola vez ya que la segunda vez no solidifica bien.
    Puedes preparar el medio , vertirlo a los frascos y de una vez a la olla a presión. En cuanto pierda la presión lo sacas y lo dejas enfriar y solidificar sin moverlo.
    Espero sirva.
     
  7. vegetalia

    vegetalia

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Muchas gracias Eliseo
    Tu siempre sacandonos las castañas del fuego.
    Ya me olía yo que era lo culpa de cuajar el agar dos veces. Pero si lo pongo directamente en la olla, se queda todo el bote sucio al hervir. Supongo que es un mal necesario.
     
  8. eliseoteson

    eliseoteson

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Si pones la olla a presión en lento no suele salpicar y manchar los frascos y sobre todo deja que perda la presión sola antes de abrirla. El medio hierve al liberar la presión de la olla y mancha los frascos pero si se espera a que la olla se enfríe sola no se presenta ese problema.
     
  9. vegetalia

    vegetalia

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    ok, Eliseo. Lo probaré. Siempre dejo que pierda la presión ella sola, pero la verdad es que al principio la pongo a fuego fuerte. Así que la próxima vez la pondré flojito desde el principio.

    Como siempre un saludo y mil gracias por los consejillos.
     
  10. betofesa

    betofesa

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Gracias Eliseo y vegetalia, lo probaré, solo comentarles que utilicé 5 gr pero para medio litro porque fueron pocos frascos los que prepare, vere como resulta esta vez. Ya les comentaré que tal me fué ;)
     
  11. vegetalia

    vegetalia

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Echando un vistazo por Internet he encontrado este documento pdf , que me ha parecido muy interesante (lo he descargado y lo he puesto en favoritos ;) ) Y he querido compartirlo con vosotros que me habéis ayudado tanto.
    Espero que a alguien le sea de utilidad.


    https://www.google.es/url?sa=t&sour...gQFjAA&usg=AFQjCNFSKq7et4RU-sG9GXJm8l2Uqha6VQ



    También os quería preguntar por lo medios de cultivo comerciales ya que no termino de obtener buenos resultados con el medio del tomate y la banana. Así que cual me recomendáis?, donde lo compráis? , y que precio tiene?

    Gracias por todo.
     
  12. supercalifragilisticoespi

    supercalifragilisticoespi

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    El agar agar puede ser en fibras
     
  13. supercalifragilisticoespi

    supercalifragilisticoespi

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    El agar agar puede ser en tiras
     
  14. eliseoteson

    eliseoteson

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    da igual la presentación puede ser en polvo en fibra en tiras. lo importante es pesarlo bien
     
  15. Manzano2008

    Manzano2008 Juan Gómez Manzano

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    Re: In vitro I y II. Preparacion del medio y siembra

    Hola amigos, feliz de la vida cuando vi florecer a una Phalaenopsis de una aventura in vitro:
    Este es el padre:
    [​IMG]
    La madre es una phal grande:
    [​IMG]
    La hija, en su primera floración las flores son igeramente rosadas.
    De tamaño superior al del padre pero menos que la madre, en sus siguientes floraciones espero que iguale a la madre:
    [​IMG]
    Ahora estoy probando un método rudimentario con una semillas de Cattleya que salieron por casualidad:
    [​IMG]
    Ya les contaré cuando me convenza qe así no es el tema.
    Saludos de Perú.
     
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