Medios de cultivo para micropropagación in vitro: busco ingredientes

estoy tratando de propagar yemas de vid, mediante varios metodos (del taper, camara humeda, etc) pero han fallado.

quisiera micropropagar mediante el metodo in vitro, pero necesito los "ingredientes" del medio de cultivo.

alguien quien sepa o hay trabajado en esto podria darme una manito!?
se lo agradeceria mucho

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Lo que necesitas es un verdadero laboratorio, fuera del alcance de cualquier buen aficionado.

A parte del medio ( a base de agar, nutrientes y factores de crecimiento especificos para cada planta) necesitarías aparatos de esterilización, lentes binoculares, material de laboratorio ( tubos de ensayo, probetas, pipetas, etc.).

Olvídalo.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

si no tuviera conque trabajar no estaria pidiendo un poco de informacion! el asunto es q me gusta trabajar por mi propia cuenta!
si no le haria un contrato a un especialista! y q el mismo lo haga! pero quiero experimentar por mi mismo...

de todos modos gracias

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Bronco:

No dudo de tu interés, ni de tus habilidades, pero lo que pides es una asignatura que dura como poco un cuatrimestre. Se sale de los limites del foro.

Es algo así como si alguien preguntase: Me gustan mucho los animales, alquién puede decirme ¿ como se realiza una operación de cadera en un perro ?


De todas formas, voy a buscar bibliografía y te la paso.

Saludos.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Bien, para empezar, echale un vistazo a este link.

http://www.inta.gov.ar/sanpedro/info/doc/pdf/md_0701.pdf


Te da una visión general de lo que pretendes.



Luego un par de buenos libros:

Uno en inglés:

INTRODUCE TO PLANT TISSUE CULTURE (SECOND EDITION)

Autor/es : RAZDAN, M.
ISBN: 1-57808-237-4
Edición: 2002
Características: 330 págs. 2ª edition
Editor: SCIENCE PUBLISHERS, INC.
Idioma: Ingles
Precio(con IVA) 86,49 Euros.


Y otro de la escuela de agrónomos donde estudié. Es del politecnico de Valencia en españa y por supuesto esta en castellano.


PRÁCTICAS DE CULTIVO IN VITRO Y TRANSFORMACIÓN GENÉTICA DE P LANTAS


Autor/es : GISBERT DOMENECH, C. / Y OTROS
ISBN: 84-8363-307-8
Edición: 2008
Características: 98 págs.
Editor: UNIVERSIDAD POLITECNICA VALENCIA
Idioma: Español
Precio(con IVA) 10,90 Euros.


Espero haberte ayudado.

Saludos.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

ups!! se me paso la mano. sorry!!

muy agradecido. de veras q muchas gracias!

gracias por los datos!!

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Bronco en la siguiente pagina:

http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/h_cuaderno.asp

En el cuaderno 35 encontraras lo que buscas para hacer el experimento, ahi te guia paso a paso, suerte con la micropropagacion, Saludos.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Gracias Alejandro.

Pues me lo he leído y... Me recuerda a algunos programas que dan en la televisión por acá. Se refieren a bricolage ( ya sabes hacerte tu mismo algo).

Hacen cosas maravillosas con solo un martillo y poco mas. A ellos todo les sale bien, pero cuando uno lo intenta...

Todos comienzan mas o menos así:

Queridos teleespectadores, para nuestra clase de hoy, necesitaremos una paleta de albañilería, arena, cemento, algo de agua.... y bla, bla, bla

Y terminan:

Aquí pueden ver, como nos han quedado las Torres Gemelas de 110 pisos de altura, que hemos recontruido para Uds. Muy buenas tardes... y hasta la próxima.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

totalmente coincido con jm he trabajado en propagacion de meristemos y te aseguro que no es agarrar una hojita de afeitar una lupa y un poco de gelatina como sustrato ja ja. realmente tienes que dividir y multiplicar celulas darle el sustrato y nutrientes adecuados mas las proporciones de parte por millon de diferentes acidos estimulantes de hormonas ANA ,INDOLBUTIRICO , ETC es muy interesante y puedes lograrlo pero sin un laboratorio, conocimiento profundo de botanica y muchiiiiiisima paciencia no lo lograras igualmente estoy para lo que te pueda ayudar. Yo tengo almendros injertados sobre pie de plantas in vitro.desde este rincon del sur saludos

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Estoy totalmente de acuerdo con ustedes (jlmelida, aleuruguay) pero quisiera saber quien de ustedes aprendio a andar en Bicicleta en un solo dia?

Quien de ustedes ha realizado injertos?

Les pego el primero? Les pego el segundo?

A poco por que tenemos la pagina de Mundani y la hemos leido somos unos expertos en injertos.

http://www.jardin-mundani.com/empelts/INJERTOS.htm

En Abril de este año realize 2 injertos de corona bajo bolsa de plastico en un naranjo que tienen en casa de mis padres y no pego ninguno, en Junio los volvi hacer los 2 y no pegaron, las dos veces segui las instrucciones de la pagina y nada.

Pero ya me estoy preparando para el 21 de Marzo del 2009 que es cuando comienza la primera y los arboles despiertan del invierno para volverlo a intentar, si vuelvo a fracasar tendre otra oportunidad de volverlo a intentar en Mayo, solo que esta vez en otras ramas le voy hacer el de Chapa o Escudete al mismo tiempo.

A mi siempre me han gustado los arboles frutales en casa de mis padres teniamos 2 Duraznos (Melocoton), 4 Chabacanos, un nispero, una higuera y un ciruelo, un naranjo injertado agrio con dulce da de las dos naranjas y un nogal que da la nuez criolla, ahora solo quedan el naranjo y el nogal.

Hace como 3 años al nogal y a al naranjo les pego la termita, al naranjo le entro por el lado dulce que es el mas afectado pero conseguimos un insecticida que se le pone con agua y se le hecha en la tierra y de ahi se absorve por dentro del arbol y mata todas las plagas que ataquen o tenga el arbol y como la rama del lado dulce fue la mas afectada por eso estoy intentando injertarlo de nuevo en las ramas del lado agrio.

Han intentado enraizar esquejes? etc, etc.

Somos unos aficionados a esto, le dedicamos parte del tiempo libre que tenemos pero debemos de tener metas aun como aficionados, en Enero voy a tener vacaciones y le pienso dedicar mucho tiempo a eso del cuaderno 35.

Pienso que como miembros del foro estamos para ayudarnos y si no sabemos lo que algun miembro pregunta lo mejor es no contestar o tratar de quitarle esa inquitud que trae por hacer algo.

Sin mas por el momento me despido con un cordial Saludo

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Hola Alejandro:

Entiendo perfectamente tu postura y te animo a que sigas progresando en tus aficiones.

Lo que ocurre es que el tema planteado en este hilo es de una complejidad que se escapa a las posibilidades de un buen aficionado.


Pongamos un ejemplo que no tenga nada que ver. Imagina que soy un gran aficionado a la mecánica. Puedo coger mi auto, efectuar pequeños mantenimientos, quizás efectuar pequeñas modificaciones para conseguir un par de caballos mas, etc.

Pero no podré rebajar los cilindros, para aumentar la capacidad del motor o "meterle mano" a la centralita electrónica, para conseguir que mi auto de serie, tenga 50 CV mas de los que tiene. ¿ Por qué ?

Pues porque para hacer eso, necesito un supertaller, con una serie de medios y equipos sofisticados y desde luego una preparación tecnológica ( años de estudio). Si eso lo tengo, por definición, dejo de ser un aficionado

Esto es lo que quería decir en este post.
Para injertar, no se necesita una alta tecnología. Hay que tener unos conocimientos mínimos y mucha práctica, pero.. nada mas. Igual para enraizar esquejes.

La micro, es otra cosa. Requiere una sólida formación ( manejo de laboratorio, fisiología vegetal, microbiología) y un equipo caro y sofisticado. Si lo consigues, dejas de ser un aficionado y quizás, ya no sea este el foro apropiado para ti.

Saludos.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Tampoco exageremos, el cultivo in vitro es complicado pero si que se puede realizar en plan casero con paciencia y dedicación. De acuerdo que no podrás realizar protocolos de embriogénesis o de modificación genética, pero no veo tan dificil la micropropagación de yemas.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Solamente como ejemplo: ¿ Podrías indicarme como preparo un medio de cultivo con los utensilios que tengo en mi casa ?

¿ Como peso mg de nutrientes ?, ¿ como disuelvo el agar y lo esterilizo.? En el Super no lo venden.

Y como veo donde estan los meristemos de mi plantita y los separo... Porque supongo que ya metidos en aventuras querras obtener plantas libres de virus.

No, decididamente no creo que sea tan fácil.

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

Pues el medio de cultivo puedes prepararlo a base de tomate, plátano, sacarosa, tabletas de vitamina B1, abonos líquidos, etc... hay un monton de medios de cultivo caseros desarrollados para orquídeas que estoy probando en estos momentos.
La otra opción, más sencilla, es comprarlo directamente a un laboratorio. No es muy caro, aunque cuesta encontrarlo.
El agar no lo venden en los supermercados, pero casi casi, lo tienes en las tiendas de dietética, y sino en cualquier tienda de material de laboratorio, yo compro 100g por unos 3euros, verás que no se sale del presupuesto..
Lo añades al medio de cultivo en caliente y lo esterilizas en la olla express durante 30-40minutos, este punto es el menos conflictivo.
Para la siembra de explantos la opción más barata es fabricarse una Glove-box, y si vas más en serio una flowhood con filtro HEPA.
No he dicho nada de obtener plantas libres de virus, sino de micropropagar yemas axilares (hablo de plantas herbáceas).
En cuanto a las hormonas, si lo que queremos es simplemente enraizar un brote no habrá mucho problema, el AIB se vende en casi cualquier vivero y podremos hacer un medio con auxinas al que repicar el explanto cuando queramos.
jlmelida, al principio yo era tan escéptico como tu, créeme.. hay soluciones caseras para muchas cosas, aunque evidentemente tenemos que conocer nuestras limitaciones.
saludos

 

Re: MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROPROPAGACION!

No es que sea excéptico, sino que he trabajado a nivel profesional en una firma de floricultura. Concretamente se trataba de clavel Sim, obtenido virus-free, a partir de meristemos.

Una vez obtenidos, muchos de ellos resultaban contaminados por virus ( a pesar de que el meristemo es la parte de la planta mas libre de virus) y teníamos que desecharlos o someterlos a termoterapia durante bastante tiempo.

Luego, a partir de estos, conseguíamos las plantas madres, de las que sacabamos los esquejes para enraizar. Las plantas madres se testaban con el ELISA y cada seis meses se desechaban.

Los esquejes de clavel se destinaban en su mayor parte, para ser cultivados en Colombia.

El proceso era muy delicado y necesitaba de unos buenos laboratorios y personal muy cualificado.

Esto fué hace bastantes años y luego ya no he vuelto a tener mas contacto con ese tipo de trabajo, por lo que ignoro la evolución que haya podido tener el método.

Algunos viveros comerciales han intentado obtener plantas ( concretamente frutales) por medio del cultivo in vitro. La idea parece sugerente: muchos plantones en poco espacio. El resultado ha sido decepcionante, la planta producida por estos métodos no tenía casi calidad.

Resumen: Se pueden contar con los dedos de una mano, los viveros comerciales que ( me refiero a España) reproducen por este sistema y todos, absolutamente todos, tienen unas muy buenas instalaciones. Además han conseguido ( repito solo unos pocos) el ofrecer planta de calidad similar a la obtenida por métodos mas clásicos. Los chapuceros, no han conseguido sobrevivir. Por eso digo, que la técnica no debe ser sencilla.

Saludos.