Mi primera experiencia en cultivo "in vitro"

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por mmd58, 28/7/06.

  1. pozu

    pozu

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    Mar, ¿y las fotos de las niñas? ¿Tienen ya novio?

    Tengo una preciosa capsula de Miltonia spectabilis moreliana empezando a cambiar de color, lista para sembrar.

    Por cierto, ¿alguien sabe algo de la reunión de la CAO de este mes?
    ¡¡Podriamos hacer práctica de siembra con mi capsula!!

    Roberto
     
  2. Gena

    Gena

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    k paso con este post??? esta perdido en el olvido... con lo interesante que era....
     
  3. Eli_13

    Eli_13 Eli13

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    Mar, como fue el cultivo in vitro que iniciaste? los progresos?

    Saludos

    Eli
     
  4. Daniela10

    Daniela10 DANIELA10

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    :happy: Hola!! Muy interesante!me parece genial todo lo que día a día podemos descubrir!
    Lamentablemente yo quedé a medio camino también Fabrizio, en mi primer intento logré polinizar las cimbydium consiguiendo 3 cápsulas, solo que por falta de experiencia ya que fue mi primer intento quede en el camino, intenté hacerlo sin la cámara, y parte de ellas en otros medios naturales.
    En fin, ahora solo me queda esperar a que den flor otra vez, ya que éste año no han vuelto a dar, dado que las semillas las saqué en el mes de Marzo de éste año. Les dejo un saludo muy grande y quedo atenta día a día aprendiendo siempre un poco más!
    Gracias!:happy:
     
  5. mmd58

    mmd58 mi lindo camelio blanco

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    De por aquí ... y de por allá
    Hola.
    Aquí vuelvo a repescar el tema.
    Granuca, las semillas están vivas pero no crecen :desconsolado: .
    Sé que están vivas porque he teñido unas pocas con colorante de células y ... lo captan.
    Tengo 4 platos llenos de "moritas transparentes" que no van ni para-alante ni para-atrás.:icon_rolleyes:
    Pensé que les faltaba luz y saqué 2 platos al sol; resultado: las de un plato se pusieron marrones como tostadas y ... a la basura y el otro lo recuperé antes del desastre, aunque alguna está un poco amarilla.
    No sé qué les falta pero algo les pasa. Les voy a añadir hormonas a ver qué pasa.
    También he comprado un fluorescente de luz de día y las voy a exponer con cuidado.
    ¿Alguien está haciendo cultivo?
    ¿Alguien me puede dar alguna idea qué hacer para que espabilen?.

    Los platos están siembre llenos de vaho y es muy difícil hacer fotos pero lo voy a intentar.

    Gracias Mar
     
  6. pozu

    pozu

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    Mar me alegra que este tema siga vivo, aunque por lo que cuentas a duras penas.
    ¿Has consultado con Rubén?

    Te echamos de menos en el CAO. Este sábado hay reunión, aunque no puedo ir. ¡GUAAA!

    Saludos
    Roberto
     
  7. granucaverda

    granucaverda Cada día más despistada

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    Si están vivas ya es un consuelo, ya crecerán.
    Tengo un amigo al que enseñé a polinizar que se entusiamó y entre phals y vandas seguro que tiene por lo menos 8 cápsulas de semillas ,y puede que entre los dos lo intentemos con una, pero habrá que buscar a alguien que quiera hacer germinar todo el stock, así que material para práctica no va a faltar.
     
  8. Hola a todos Aparecí despues de unas largas vacaciones... Les cuento que mis semillas están progresando. Perdí 19 frascos de 22 pero tengo tres progresando. Uno principalmente tiene cientos de semillas germinadas, algunas con 2mm de alto mas o menos.
    Ademas polinizé una Zygostate (miniatura) y tengo 3 frascos con semillas de ella. Les adjunto una foto de una semilla de cattleya que no tiene mas de 1 mm. para que vean su desarrollo. :beso:
     

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  9. ranchu

    ranchu

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    :5-okey: hola a todos, siempre he leído este foro aunque es la primera vez que participo, les quería contar acerca de mi experiencia en la esterilización de los frascos de medio de cultivo sin tener que usar la olla a presión (la que tengo en casa es muy chica). Lo que hice fue probar dos formas diferentes una en horno convencional y la otra con el microondas.
    horno convencional:
    -llené 2 frascos de vidrio de gatorade y coloqué medio de cultivo en el horno precalentado a 150-180 °C, y los dejé por 25 minutos.
    -dejé enfriar un poco y luego los trasladé a mi cámara estéril que previamente desinfecté con fluorescente UV 60 min. y posteriormente con lejía comercial al 20%, 10 min. antes de trasladar los frascos.
    -dentro de la cámara también coloqué bolsitas de polipropileno previamente esterilizadas en mi olla a presión (por ser compactas si entraban en mi olla de 6 litros); estas bolsitas de 6x10 pulgadas las usaré para colocar el medio de cultivo. Las bolsitas se esterilizan envolviendolas todas juntas con papel aluminio.
    -una vez que trasladé el medio de cultivo, abrí con cuidado los frascos quitandoles el aluminio que tenían como tapa, y comencé a traspasar a las bolsitas que luego cerré doblando en tres la parte abierta y colocándoles un clip para que lo sujete y no se vuelva a abrir, para mayor seguridad luego las pegué con cinta adhesiva para asegurarme que no ingrese aire contaminado.

    horno microondas:
    - coloqué en frascos de gatorade (vidrio) mas o menos 1.5 centímetros de medio de cultivo, a cada frasco le añadí 1 piedra pomez (mas o menos de 4 a 5 mm), pues según he leído estas evitan que el medio explote (se rebalse) al intentar retirarlos del microondas.
    - Como prueba coloqué 3 de estos frascos y los puse por 5 minutos y gradué el microondas a una ptencia de salida de mas o menos 500 watts.

    Resultados:
    Han pasado 10 días después de la esterilización y las 8 bolsitas de polipropileno y los 3 frascos esterilizados no se han contaminado.

    Espero que les sirva de algo mi experiencia.

    Ranchu :5-okey: :5-okey: :5-okey:
     
  10. Ranchu: gracias por compartir tu experiencia Lo tendré en cuenta. Ahora una pregunta: los frascos de gatorate y bolsitas solo tienen el medio de cultivo no? todavia no colocaste las semillas ? Los mios siguen bien. en uno las plántulas ya tienen 4mm de alto. Saludos
     
  11. Gusorquideas

    Gusorquideas El Cattleyomano

    Hola a Todos GRacias a todos por compartir sus experiencias, me sirven de mucho para meterme en ello... Renchu tendre en cuenta lo de los frascos de gatorade en microondas. Solo me queda una duda como traspasas el medio de las bolsas a los frascos sin contaminarse? Un beso a todos

    Gustavo G.
     
  12. ranchu

    ranchu

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    titina: no todavia no planté en ellas lo pienso hacer este fin de semana, aunque no se si este medio servirá de mucho, pues lo hice con fertilizante 21-21-21 2.5 gr, azucar 20 gr, tiamina 1 gr y agar agar 7gr. de todas formas quiero probar pues tengo semillas de cattleya rex y cochleanthes amazonica.
    gusorquideas: no yo trasladé el medio del frasco a las bolsitas, lo hice abriendo las bolsitas sin tocar los bordes y tomé el frasco con una toalla (pues hacía poco que lo había retirado del horno y estaba muy caliente), vacié el medio sin que toque los bordes de lsa bolsas. luego juntas los bordes de las bolsitas y los doblas horizontalmente ...luego se le coloca un clip o cinta adhesiva.
    Pronto tomaré fotos a las bolsitas para que tengan una idea mas clara.
    saludos
    ranchu
     
  13. ranchu

    ranchu

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    hola a todos de nuevo, aqui les coloco una foto de las bolsitas y el frasco que esterilicé en microondas
    S4030238.JPG
     
  14. hola a tod@s...
    Alguien sabe como realizar con exito el cultivo a partir de partes de tejidos o la parte final de una raiz?
    tengo una orqui enferma y me interesaria salvarla aunque sea clonandola por este metodo y no encuentro informacion al respecto...:-?
     
  15. hola a tod@s
    hoy he probado el metodo de esterilizacion de semillas con papel de filtro y agua+lejia ...DESASTRE...:desconsolado: se ha desecho el papel cuando estaba pasandolo por los vasitos de agua para quitarle la lejia...todo al traste...:desconsolado:
    alguien puede decirme que marca de papel usa y que sea seguro...?

    un saludin....