parece que cuando están maduras se abren las vainas. Pues en ese momento se recolectan y se menten en un sitio seco y fresquito hasta que hagamos la plantación invitro.
Hola a tod@s los preñados: Aquí pongo foto de mi preñez!... Señalo los pétalos como se han ido marchitando y como la vaina se va formando, es alucinante. Saludos, Ciao.
Hola foreros La semana perdida hizo estragos en este interesante tema, ojalá podamos reconstruirlo ya que estaba sumamente interesante, yo subí algo de información el viernes pasado, misma que se llevó el viento así como el album de fotos que empleé para la parte gráfica, en cuanto tenga listo nuevamente el álbum (mas de 50 fotos) vuelvo a poner el post. Salu2s
Hola a todos: Lastima todo lo que se ha perdido, espero que de ahora en más no vuelva a ocurrir. Les cuento que fui a Corrientes a la reunión de Orquidiofilos y pregunté como se hace la siembra artesanal, ya que la semana pasada fui a la casa de una amiga y encontré dos capsulas maduras, una Laelia purpurata estriata y una Encyclia que no tengo y no se como se llama. Hay varios métodos: 1- Humedecer muy bien el sustrato de la planta madre, esparcir las semillas. No se debe regar más por arriba, hacerlo por inmerción de las 3/4 de la maseta. Este método es el menos efectivo, nacen unas pocas plantas. 2- Una bandeja de roticeria con tapa tipo campana transparente para crear una cámara de cultivo. Sustrato, leca y perlite que se debe hervir previamente para esterilizar, luego sumergir en agua con fertilizante equilibrado (15-15-15) en dosis recomendada, escurrir el exeso de agua, esparcir la semilla y tapar. 3- Recipiente igual al anterior, sustrato un trozo de madera con cascara previamente hervido y pasado por un licuado hecho con un litro de agua, 100 grs. de tomate pelado, pasado por hagua hirviendo sin semilla, una cucharada de azucar y algunas puntas de raices de la planta madre. Esparcir las semillas y tapar. El tomate aporta nutrientes y equilibra el ph, las raices aportan micorrisa (hongo) 4- Un Frasco de vidrio bien limpio, musgo de floristería al que se debe hacer hervir 3 o 4 veces cambiando el agua cada vez, apretar bien para eliminar el exeso de agua, introducir algunas puntas de raices de 3 cm, tapar por 15 dias con un vidrio o papel film,para que prospere la micorrisa, destapar, esparcir las semillas, volver a tapar. Este método es el más efectivo. Las puntas de las raices deben ser siempre de la planta madre o una planta afin ya que no todas las orquídeas tienen en mismo hongo y tienen que ser aderidas ya que las aereas no tienen micorrisa. Cuando se nota que en la parte superior del resipiente no hay condensación de humedad rociar la tapa y las paredes del recipiente, no el sustrato, para no lavar y escurrir las semillas. Pregunté si se podía usar aserrín ya que lo había escuchado y me dijeron que no era conveniente porque se apelmasa y degrada bastante rápido. Yo pienso provar varios métodos haber cual me resulta mejor. Espero les sea de utilidad estos consejos como a mi. Suerte a todos.
polinizacion Hola a todos espero que nuevamente se ponga a mil este tema,yo mande un protocolo a varios amigos del foro sobre germinacion in vitro y fotos tambien espero les haya servido un saludo a todos.
Hola a todos, Vuelvo a subir el post perdido., en este se tratan los siguientes temas: Mantención de las condiciones estériles Equipamiento necesario Preparación del Medio de Cultivo Sembrando a partir de cápsulas verdes Sembrando a partir de semillas secas Replantando protocormos Desenfrascando almácigos y sus cuidados Contaminación por manipulación La verdad es que yo tambien estoy esperando Semillas , es decir una de mis Phal y un Dendrobium, las cuales estarán listas para “dar a luz” en Octubre y Noviembre . Sobre lo concerniente a Germinación In-Vitro, me pego el bichito hace ya harto tiempo, nuestro comun amigo robert, el cual gentilmente en su oportunidad no solo me envio los archivos necesarios para llevarla a cabo, sinó que también me regaló semillas de una bletilla striata. Grande Robert Bueno, yo inicié el proceso ayer lunes, empleé la formula del plátano y esterilize por medio del Horno. Los tubos de ensayo y los frascos de cultivo están actualmente con el Medio de Cultivo (Agar-Agar) formado y me encuentro en espera de una semana antes de iniciar el proceso de sembrado de las semillas, a fin de verificar que no existan contaminaciones. Mañana subiré fotos de como quedaron. Ahora les dejo como lo estoy llevando a efecto, creo que es la forma más segura y fácil de hacer germinar semillas de orquidea en forma casera. Esto constituye parte de los archivos que me paso robert y una traducción al español realizada por el suscrito, de archivos de la página web de Lotte & Tomas Orchids. Germinación Asimbiotica de Semillas Mantener las condiciones estériles En la germinación simbiótica y asimbiotica es esencial que todas las semillas, matraces, instrumentos y medios se mantengan estériles en cada etapa del procedimiento de germinación. Si cualquier hongo o bacteria consiguen entrar a los matraces, crecerá mucho más rápido que nuestras semillas o plantas de semilla y las matarán pronto. Para prevenir estas contaminaciones, los matraces (incluyendo el medio) tienen que ser esterilizados en un autoclave o ser puestos durante 30 minutos en el horno (150º C ). Las semillas o plantulas (nodos,....) Debe ser esterilizados (por ejemplo con agua oxigenada) y transferidos a los matraces sin introducir en ellos bacterias u hongos. Formas de como se pueden mantener las condiciones esteriles: Cámara de flujo de Laminar: La cámara de flujo de laminar consta de un gabinete y una unidad de flujo de aire. La unidad de flujo incluye un filtro muy fino (filtro hepa) que elimina todas bacterias y hongos. El aire (estéril) filtrado fluye fuera del gabinete y produciendo un área estéril dentro del mismo. Antes de usar la cámara de flujo de laminar usted tiene que esterilizar la superficie interior del gabinete con alcohol de 70 - 90 %. Caja con Guantes: Una caja con guantes consta de una caja de vidrio en que (por ejemplo un acuario) que es cerrado, tiene un lado que se abre y que incluye dos aberturas para pasar las manos a través de el. Antes de que se empiece a trabajar se tiene que poner todo el equipo necesario, matraces, semillas y productos químicos dentro de la caja de guantes. Entonces/luego cerrar la caja y rociar la zona dentro de la caja con una solución desinfectante (por ejemplo alcohol) para esterilizar el área de trabajo. Trabajar sobre agua hirviendo Ésta es la manera más barata y fácil de propagar orquídeas in vitro. En esta técnica se usa el hecho de que el área donde hay vapor es estéril. El tamaño de la área estéril depende del diámetro de la olla usada. Equipamiento necesario Preparación del Medio de Cultivo Herramientas necesarias: Vaso de laboratorio de 250 ml Olla de vidrio, esmaltada o revestida de teflón Balanza Embudo de vidrio (tipo laboratorio) Horno Algo para mover los medios que se cocinan (por ej una cuchara) Artículos de consumo necesarios: Frascos (potes, tubos de ensallo, ...) Toallas de papel Agua destilada Etiquetas Medio de cultivo Papel aluminio Vasos de cultivo para siembra de semillas (frascos madres) Se de prever el empleo de tubos de ensayo para la siembra de semillas, estos debido a su longitud no se calientan mientras se encuentran en el área estéril (vapor). Vasos de cultivo para el replantio Para el replantio se debe elegir frascos de aproximadamente 10-15 cm de alto con una apertura más pequeña que 10 cm. Si el tamaño de la apertura es más grande que 10 cm., el riesgo de contaminaciones aumenta muy rápido. Los frascos de comida de niños están muy bien. Preparación de los frascos: Antes de usar los frascos de alimento para en el cultivo in vitro se debe quitar todos los restos de alimento y etiquetas. Se debe comprobar si los frascos se pueden poner a 150 º C, ya que estarán bajo esta temperatura por 30 minutos, para matar todos los hongos y bacterias. A las tapas de los frascos se les debe hacer un agujero pequeño, el cual debe ser taponado con algodón. Medios de cultivo. El medio de cultivo es una gelatina química (o natural) que tiene la capacidad de hacer germinar las semillas de orquídeas dentro de un frasco cerrado. La ventaja de usar medio de cultivo es que todas las semillas fértiles pueden a germinar y transformarse en plantas. Claro que existe una selección, mucho mas controlada que la selección natural que ocurre al aire libre. Los medios de cultivo fueron descubiertos hace varios años y a medida que el tiempo fue pasando fueron siendo mejorados, adaptados transformados y cambiados. Al cabo de muchos años cada laboratorio descubrió su propia fórmula (y cada profesional también) pero analizando cada una de ellas llegamos a la conclusión de que todas tienen partes comunes y son semejantes a las del Professor Knudson. Veremos varias formulas, ya que todas funcionan, algunas son mejores que otras, y dentro de un tiempo cada uno de ustedes habrá optado por trabajar con una sola fórmula especifica. Todas las fórmulas llevan un producto llamado agar agar, (gelatina vegetal sacada de una especie de algas marinas). Se encuentra fácilmente en farmacias homeopáticas, en restaurantes o casas de comidas chinas. También puede ser conseguido en laboratorios que trabajen con bacteriología o en centros que trabajen con "drosófilas" (moscas de la fruta). Todas funcionan perfectamente siempre que el pH se encuentre dentro de la franja ácida de 4.8 a 5, Hay que medirlo siempre con la mezcla caliente. En la fórmula de tomates el pH ya es el indicado. Una fórmula muy usada es la del tomate con banana. (Ver tabla de fórmulas) Tabla de fórmulas para Medios de Cultivo 1 Fórmula de Knudson "C" 1.0 g de Nitrato de Calcio 0.250 g de Fosfato monopotásico 0.250 g de Sulfato de Magnesio 0.500 g de Sulfato de Amonio 0.025 g de Sulfato de Hierro 0.0075 g de Sulfato de Manganeso 20.0 g de azúcar 10.0 g de agar agar 1000 ml de agua destilada 2 Fórmula del plátano 100.0 g de plátano maduro hecho puré o licuado 10.0 g de agar agar 15.0 g de azúcar 1.2 g Tiamina * 900 ml de agua destilada 3 Fórmula del Tomate 250.0 g de tomate maduro y sanos, hacer una pasta y colar en colador muy fino. 10.0 g de agar agar 15.0 g de azúcar 1.2 g Tiamina * 900 ml de agua destilada 4 Fórmula de la Piña 200 ml de jugo de piña, dulce y madura 10.0 g de agar agar 15.0 g de azúcar 1.2 g Tiamina * 800 ml de agua destilada 5 Fórmula de Tomate con Zanahoria 100.0 ml de jugo de zanahoria 100.0 ml de jugo de tomate 10.0 g de agar agar 15.0 g de azúcar 1.2 g Tiamina * 800 ml de agua destilada 6 Fórmula de Tomate con plátano 40 g de plátano hecho puré o licuada 100.0 ml de jugo de tomate 10.0 g de agar agar 20.0 g de azúcar 1.2 g de Tiamina * 900 ml de agua destilada 7 Fórmula del Profesor Burgeff 1.0 g de Nitrato de Calcio 0.250 g de Sulfato de Amonio 0.250 g de Sulfato de Magnesio 0.020 g de Sulfato de Hierro 0.250 g de Fosfato bipotásico 0.250 g de Fosfato monopotásico 20.0 g de azúcar o miel de abejas 12.0 g de agar agar 1 litro de agua destilada 8 Fórmula de La Garde 1.0 g de Sulfato de magnesio 1.0 g de Nitrato de Calcio 1.0 g de Fosfato monopotásico 1.0 g de Clorato de Calcio 0.500 g de Nitrato de Amonio 0.500 g de Carbonato de Amonio 0.050 g de Fosfato de Hierro 20.0 g de azúcar 12.0 g de agar-agar 1 litro de agua destilada 9 Fórmula usada en Hawai 1.5 cucharada de té de emulsión de pescado 1.0 cucharada de té de peptona 12.0 g de agar agar 20.0 g de azúcar 1 litro de agua destilada 10 Fórmula más Casera 3 cc de abono DynaGro 7-9-5 o 10-5-5 12.0 g de agar agar 20.0 g de azúcar 2.0 g de carbón vegetal o carbón activado 5 tomates perita sin semillas (aquellos bien chiquitos) 150.0 ml de agua de coco 40.0 g de banana (mas o menos media banana) 800 ml de agua destilada * 4 comprimidos de algún remedio compuesto de Tiamina (vitamina B1) de 300 mg. Puede ser substituido por complejos polivitamínicos (Teragram M o Supradyn). Preparación del Medio de Cultivo 1. Preparar las cantidades correctas de compuestos del medio de cultivo por separado. 2. Poner el agua destilda a calentar en una olla de vidrio, esmaltada o revestida de teflón. 3. Encienda el horno a 150 ºC. 4. Cuando está a punto de hervir el agua se apaga el fuego y se virten en la olla los componentes 5. Mezclar usando una cuchara de madera o de plástico hasta disolver todos los componentes 6. Mida el pH y ajustelo (use HCL para disminuirlo y NaOH para incrementarlo). 7. Distribuya el medio de cultivo en los tubos de ensallo y frascos. Tenga cuidado que el medio de cultivo no entre en contacto con la apertura de los frascos, ya que esto puede ayudar a la contaminación por hongos y bacterias. El embudo de vidrio es sumamente útil. 8. Cada frasco debe recibir en el fondo una cantidad de preparado de más o menos 1 centímetro (50 ml) lo que nos permite hacer con cada litro de preparado mas o menos 20 frascos. 9. Terminado el fraccionamiento, tapamos bien los frascos. En los tubos de ensayo se debe poner un tapón de algodón y pasamos a la otra etapa que será la esterilización de los frascos y del medio de cultivo 10. Ahora se debe cubrir los frascos con papel aluminio. En los tubos de ensayo se recomienda cubrirlos con doble papel aluminio para asegurar que los tapones de algodón permanezcan en su lugar. Por último ponga todos los frascos en el Horno previamente encendido. 11. Después de 30 minutos apague el horno pero no lo abra aún. Permita que los frascos se enfrien en el horno cerrado. Se recomienda preparar el medio de cultivo después de la comida de la noche, así los frascos pueden permanecer en el horno hasta la mañana siguiente. 12. Saque los frascos del horno y déjelos descansar al menos por 5 días para asegurarse que estén estériles. Esterilizando agua destilada Cuando ocupe semillas secas, necesitará agua destilada estéril para enjuagarlas después que hayan sido esterilizadas. Es muy fácil hacer agua destilada estéril. Ponga agua destilada en un frasco o jarra que se pueda tapar atornillandola, tápela sueltamente y cubra la tapa con papel aluminio. Ahora puede esterilizar el agua junto con los frascos con el medio de cultivo en el horno. Sembrando a partir de semillas verdes El interior de una cápsula de semillas de orquideas, si esta intacta, se encuentra naturalmente estéril. Si usted esteriliza el exterior de la cápsula y la abre bajo condiciones de esterilidad, las semillas permanecerán estériles. Este método tiene la ventaja que las semillas mismas, no necesitan ser esterilizadas (lo cual a veces les puede ocasionar daño). Además, algunas semillas, al ser tomadas de cápsulas que estan casi maduras, germinan más rápido que aquellas tomados de cápsulas maduras. Herramientas necesarias: Parrilla Herramienta de replantío (Espátula) Olla Pinzas Mechero de alcohol Escalpelo Guantes Artículos de consumo necesarios: Frascos o tubos de ensayo con medio de cultivo Cloro (solución blanqueadora) Papel toalla Frasco atornillable (de comida para bebes) Ethanol al 70% Bandas elásticas Ventajas de las cápsulas verdes: Fácil de esterilizar No hay que esperar que la cápsula suelte sus semilla Desventajas: No hay seguridad al 100% de que las semillas de la cápsula se encuentren maduras y fértiles. Muy a menudo las semillas en la cápsula no están completamente secas, por lo tanto el excedente de semillas no se puede guardar en el frigider (nevera) para un uso posterior. Preparando el area de enfrascado: Ocuparemos el vapor que se forma encima de una olla con agua hirviendo, para producir condiciones estériles. Para minimizar el riesgo de contaminaciones se deben eliminar las corrientes de aire tanto como sea posible. Cierre todas las ventanas y puertas mientras usted esta enfrascando. En la imagen siguiente se puede ver un arreglo de instrumentos para persona diestra. Próximos pasos: Abra el frasco con Ethanol al 70% y ponga en el sus pinzas y espátula. Ponga cerca de 3 cms. de agua en la olla y encienda el quemador de la cocina. La temperatura del agua hirviendo debe ser lo suficientemente alta como para producir un caudal constante de vapor. Tan pronto como el agua comience a hervir, tome un poco de toalla de papel, empápela con Ethanol al 70% y úsela para limpiar y desinfectar la parrilla. Cuando termine de limpiarla, póngala sobre la olla. Esterilización de la cápsula verde: Cuidadosamente retire los restos de flor en la cápsula, a fin de reducir los riesgos de contaminación Cápsula lista para esterilización Enjuague su frasco atornillable con ethanol al 70% y luego llénelo con Cloro. Ponga la cápsula dentro del frasco y asegúrese de que quede completamente inmersa. Sembrando las semillas: Los siguientes pasos deben ser realizados en el área estéril (vapor). El tubo de ensayo abierto y su tapón debe permanecer en el vapor hasta que sea cerrado nuevamente. Después de esterilizar la cápsula por 15 minutos, usted puede iniciar la apertura de la cápsula en el área estéril. Póngase los guantes, empape una pieza de papel toalla con ethanol y déjela sobre la parrilla. Tome el frasco que contiene la cápsula y ábralo sobre el vapor. Deje la tapa en cualquier parte de la mesa y con las pinzas previamente flameadas transfiera la cápsula a la pieza de papel que dejo en la parrilla. Mantenga sus pinzas por un corto momento en el agua hirviendo y luego vuelva a dejarlas en el frasco con ethanol. Abra la cápsula empleando las pinzas y el escalpelo previamente flameados. Después mantenga por un corto momento ambas herramientas en el agua hirviendo y vuelva a dejarlas en el ethanol. Tome un tubo de ensayo y remueva la tapa de aluminio. Deje la tapa de aluminio en la mesa sobre un papel previamente empapado con ethanol. Con las pinzas previamente flameadas, saque el tapón de algodón y déjelo en la parrilla. Flamee su espátula y tome algunas semillas con ella. Transfieralas al interior del tubo dejándolas sobre el medio de cultivo. Después mantenga la espátula por un momento en el agua hirviendo y luego déjela en el frasco con etanol. Tome las pinzas que estan sujetando el tapón de algodón y vuelva a tapar el tubo. Mantenga por un momento las pinzas en el agua hirviendo y vuelva a ponerlas en el etanol. Flamee el tapón de algodón Ponga la tapa de papel aluminio en el tubo de ensayo. Asegúrese que el papel aluminio no se mueva colocándole una banda elástica. Tener presente: Los frascos abiertos y sus tapas tienen que quedarse en el vapor hasta que sean cerrados otra vez No haga movimientos rápidos mientras los frascos esten abiertos en el vapor No hable mientras los frascos esten abiertos sobre la parrilla (use mascarilla) Cuidados posteriores: Colocar los frascos en un alféizar como se muestra en la siguiente imagen. La temperatura aproximada es de 20 °C. Es muy importante prevenir el sol directo porque las semillas en los frascos se achicharrarán con el. Si no se dispone de un alféizar se puede usar tubos fluorescentes de 20 Vatios. Se aconseja colocar los frascos en sitios diferentes, según sean las necesidades de cada especie para germinar. Sembrando a partir de semillas secas Si usted quiere ocupar semillas secas, tiene que esperar hasta que la cápsula se abra. Cuando la cápsula comienza a abrirse espontáneamente, corte la cápsula y vacíe sacudiendo las semillas secas sobre una hoja de papel. Antes del proceso de esterilizar las semillas se debe remover todas las contaminaciones (las partes de la cápsula, tubos de polen...) Herramientas necesarias: Parrilla Herramienta de replantío (Espátula) Olla Pinzas Mechero de alcohol Escalpelo Guantes Artículos de consumo necesarios: Frascos o tubos de ensayo con medio de cultivo Agua oxigenada al 2% Papel toalla Frasco atornillable (de comida para bebes) Ethanol al 70% Frasco de Agua destilada estéril Bandas elásticas Ventajas del empleo de semillas secas: Usted puede guardar parte de las semillas en el frigider o nevera para uso posterior. Desventajas: Alto riesgo de contaminación ya que no es tán facil de esterilizar como las vainas verdes Se debe esperar hasta que las cápsulas se abran Preparando el área de enfrascado: Ocuparemos el vapor que se forma encima de una olla con agua hirviendo, para producir condiciones estériles. Para minimizar el riesgo de contaminaciones se deben eliminar las corrientes de aire tanto como sea posible. Cierre todas las ventanas y puertas mientras usted esta enfrascando. En la imagen de abajo se puede ver un arreglo de instrumentos para persona diestra. Solución de Agua Oxigenada al 2%: Para reducir la concentración del Agua Oxigenada comprada (por ej. H2O2 al 35%) al 2% requerido, se le debe agregar agua destilada. Con la formula de abajo se puede calcular como obtener una solución al 2%. Ejemplo: ml de Cantidad buscada de Agua Oxigenada al 2% : 50 ml Concentración de la solución comprada : 35% Porcentaje de dilución buscada : 2% ml de Concentración a diluir : X Formula: ml de Concentración a diluir = (ml de Cantidad buscada * dilución buscada) / Concentración X = ( 50 * 2 ) / 35 X = 2,86 En este ejemplo usted tiene que poner 2,86 ml de Agua Oxigenada (H2O2) al 35% en su Vaso de Laboratorio de 250 ml y agregarle agua destilada hasta completar los 50 ml, para obtener Agua Oxigenada con una concentración del 2%. Próximos pasos: Abra el frasco con Ethanol al 70% y ponga en el sus pinzas y espátula. Ponga cerca de 3 cms. de agua en la olla y encienda el quemador de la cocina. La temperatura del agua hirviendo debe ser lo suficientemente alta como para producir un flujo constante de vapor. Tan pronto como el agua comience a hervir, tome un poco de toalla de papel, empápela con Ethanol al 70% y úsela para limpiar y desinfectar la parrilla. Cuando termine de limpiarla, póngala sobre la olla. Esterilización de las semillas secas: Empaque sus semillas en papel filtro como se muestra abajo. Ponga unos 3 cm de Agua Oxigenada al 2% en un frasco con tapa atornillable y luego coloque el sobre de papel filtro con las semillas en el. Cierre fuertemente la tapa y agite el frasco por 10 minutos, asegurándose que el sobre este en contacto con la solución de esterilización tanto como sea posible. Otra forma de esterilizar las semillas: Las semillas solamente pueden ser esterilizadas con productos químicos, pues otro recurso las mataría. De los productos químicos mas fáciles de conseguir y que todos tienen en casa, usaremos el "aguajane" comercialmente llamado Cloro, Clorox, Agua lavandina etc. Normalmente, estos productos de limpieza están preparados a una concentración del 22%, esta indicación está en el rótulo y debe ser observada atentamente. Para desinfectar las semillas usamos una solución preparada con agua destilada y cloro, que al final tendrá una concentración que puede variar entre 6% y 10%. Para hacer una concentración del 7.5% se mezclan 1 ml de cloro en 10 ml de agua destilada. Tomaremos un pequeño frasco con tapa (que puede ser de penicilina inyectable, un tubo de ensayo pequeño o otro con capacidad de 5ml) y colocaremos una pequeña cantidad de semillas en su interior, llevando las semillas restantes nuevamente al refrigerador o nevera. Después verter unos 2 ml de la solución preparada sobre las semillas, tapar y agitar por 8 minutos aproximadamente. Dejar descansar el frasco por aproximadamente 1 minuto en posición vertical. Durante este reposo observaremos en el frasco que una parte de las semillas se deposita en el fondo y una otra parte queda flotando. Estas semillas que flotan son semillas infértiles y serán eliminadas. Pasado el minuto de descanso, tendremos que retirar lo máximo posible el cloro y las semillas flotantes, lo que haremos con auxilio de una jeringa sin aguja (la aguja se tapa con las semillas), y cuidando de no mover demasiado el frasco para evitar que las semillas del fondo se levanten. Retirado el cloro debemos colocar en el frasco 2 ml de agua destilada para lavar las semillas y retirar el exceso de cloro restante. Colocada el agua agitar por un minuto que es suficiente. En un embudo, colocar un papel de filtro (de los usados para colar café) y voltear las semillas y el agua y esperar la absorción del líquido, quedando sobre el papel las semillas. Sembrando las semillas: Los siguientes pasos deben ser realizados en el área estéril (vapor). El tubo de ensayo abierto y su tapón debe permanecer en el vapor hasta que sea cerrado nuevamente. Después de esterilizar las semillas usted puede comenzar a transferirlas a los tubos de ensayo. Póngase los guantes, tome el frasco que contiene el agua destilada esteril y abralo en el vapor, luego póngalo sobre la parrilla. Ahora tome el frasco de las semillas y abralo en el vapor. Flamee sus pinzas y transfiera el sobre al agua destilada estéril. Tome una toalla de papel y empápela con ethanol dejándola en la parrilla, después de enjuagar el sobre por algunos segundos en el agua destilada estéril, muevalo con las pinzas previamente flameadas a la toalla de papel. Flamee el escalpelo y con la ayuda de las pinzas abra el sobre. Mantenga su escalpelo y pinzas por unos momentos en el agua hirviendo y luego vuelva a ponerlos en el frasco de ethanol. Tome un tubo de ensayo y saque la tapa de papel aluminio dejándola en la mesa sobre una toalla de papel previamente empapada con ethanol. Tome nuevamente las pinzas y flameelas, luego saque con ellas el tapón de algodón y déje ambos (pinzas y tapón de algodón) sobre la parrilla. Flamee su espátula y tome algunas semillas con ella. Transfiera las semillas directamente dentro del tubo dejándolas sobre el medio de cultivo. Después mantenga por un momento la espátula en el agua hirviendo dejándola luego en el frasco de ethanol. Tome las pinzas con el tapón de algodón y tape el tubo de ensayo. Mantenga por un momento las pinzas en el agua hirviendo y luego déjelas en el frasco de ethanol. Flamee el tapón de algodón. Ponga la tapa de papel aluminio en el tubo de ensayo. Asegúrese que el papel aluminio no se mueva colocándole una banda elástica. Tener presente: Los frascos abiertos y sus tapas tienen que quedarse en el vapor hasta que sean cerrados otra vez No haga movimientos rápidos mientras los frascos esten abiertos en el vapor No hable mientras los frascos esten abiertos sobre la parrilla (use mascarilla) Cuidados posteriores: Colocar los frascos en un alféizar como se muestra en la siguiente imagen. La temperatura aproximada es de 20 °C. Es muy importante prevenir el sol directo porque las semillas en los frascos se achicharrarán con el. Si no se dispone de un alféizar se puede usar tubos fluorescentes de 20 Vatios. Se aconseja colocar los frascos en sitios diferentes, según sean las necesidades de cada especie para germinar. Replantando protocormos Herramientas necesarias: Parrilla Olla Guantes Vela Pinzas Artículos de consumo necesarios: Frascos con medio de cultivo Ethanol al 70% Papel toalla ¿Cuándo tengo que replantar mis protocormos ? Deje crecer a los protocormos en el medio de cultivo mientras no se dañen a si mismos o hasta antes de que comiencen a formar sus primeras raíces. Mientras más grandes y más sanos sean, tanto mejor sobrevivirán el replantio. Sembramos pequeñas cantidades de semillas en los frascos, entonces podemos esperar un poquito más para que los protocormos sean más fuertes cuando los replantemos. Protocormo de Encyclia vespa listo para replantar Técnica de replantío: Los siguientes pasos deben ser realizados en el área estéril (vapor). El tubo de ensayo y frascos abiertos asi como su tapón o tapa deben permanecer en el vapor hasta que sean cerrados nuevamente. Póngase los guantes, tome un tubo de ensayo (frasco madre) y quite la tapa de papel aluminio. Deje la tapa de papel aluminio en la mesa sobre un papel toalla previamente empapado con ethanol. Tome las pinzas y flameelas, luego saque con ellas el tapón de algodón y deje ambos sobre la parrilla. Ahora tome un frasco de replantío y quite la protección de papel aluminio en el área estéril (vapor). Abra el frasco y deje la tapa y el frasco de replantío en la parrilla. A continuación tome la espátula y pásela por la flama de su vela para esterilizarla. Antes de que usted recoja algún protocormo, introduzca la espátula en el medio de cultivo donde estos crecen, para enfriarla. Después tome algunos protocormos y transfiéralos al nuevo frasco. Ahora sumerja su espátula en el agua hirviendo para limpiarla y coloquela limpia en el etanol hasta que la necesite para el próximo frasco. Cierre el frasco replantado y colóquelo sobre la mesa para su posterio etiquetado. Con los otros frascos de replantío proceda de la misma forma. Desenfrascando plantones (seedlings) Herramientas necesarias: Pinzas Si tiene frascos de vidrio: Corta vidrios y martillo Artículos de consumo necesarios: Sustrato para plantones o gránulos de arcilla Hojas plásticas Papel toalla Cajas transparentes Solución desinfectante ¿Cuándo debo desenfrascar mis plantones? Deje a sus plantones crecer en el medio de cultivo mientras ellos no se dañen a si mismos y crezcan bien. Tanto más grande ellos sean más fácil ellos sobreviviran el desenfrascado. No obstante lo anterior, la mejor temporada para llevarlo a efecto es la primavera. estos plantones están lo suficiente grandes para desenfrascarlos Importante de saber El medio de cultivo en los frascos contiene altas concentraciones de azucar (cerca de 20g/litro) para efectos de un rápido crecimiento. Las plantas in vitro pueden obtener estos componente muy fácil, es así que ellas detienen la fotosintesis. Dentro del frasco la humedad es sumamente alta luego las plantas mantienen sus stomatas (aperturas para cambio de gas y respiración) abiertas todo el tiempo. Mientras las stomatas estan abiertas la planta pierde agua pero al estar dentro del frasco no son afectadas. En la vida silvestre las plantas abren su stomatas para absorber CO2 para producir el azúcar y otros compuestos necesarios. En la noche las plantas cierran su stomatas porque sin la luz ellas no son capaces de transformar el CO2 a otros compuestos. Debido a los restos de medio de cultivo en las raices (que hace que las stomatas sigan abiertas) y otras contaminaciones en los plantones, estos pueden morir luego del desenfrascado. Cuando usted limpia acusiosamente los restos de medios de cultivo, enjuagando el plantón en agua ‘quitada de frio’ pero no tibia y luego lo sumerge en una solución desinfectante (fungicida sitémico) antes de replantarla, está reduciendo al mínimo el riesgo de pérdida. Procedimiento de desenfrascado En primer lugar tenemos que humedecer una toalla de papel. Ahora se debe llenar con 5 cm de sustrato de plantones o gránulos de arcilla, una caja plástica y humedecerla. En el siguiente paso se abre el frasco. Si el cuello de la botella o frasco es pequeño es mejor romper el fondo. Retire las partes grandes de agar-agar y coloque los plantones en agua ‘quitada de frio’ para sacar todo el agar-agar restante. Trate de separar los plantones sin romper sus raíces y coloquelos separados sobre el papel toalla. Ahora sumerja sus plantones por 10 - 15 minutos en una solución suave desinfectante (Fungicida sistemico al 50% de lo indicado en la etiqueta). Después ponga los plantones en cajas comunitarias y rieguelos (rocio fino) con la solución desinfectante suave. La siguiente imagen muestra como colocar los plantones en el sustrato. Para proporcionar a nuestros plantones un ambiente húmedo, envolvemos la caja plástica con un pedazo de hoja plástica. Coloque la caja en un lugar brillante, pero no soleado. Compruebe cada 3 o 4 días si los gránulos de arcilla están aún bastante mojados. Los gránulos no proporcionan ninguna sustancia nutritiva, entonces tenemos que "alimentar" nuestros plantones con fertilizante de orquídeas (mitad concentración) un vez cada 4 semanas. con ‘papel’ plástico selle la caja de plantones Tan pronto como los plantones esten grandes para quedarse en la caja plástica se debe separarlos otra vez y colocarlos en pequeñas macetas (1 o 2 plantas en cada una). Para estos plantones recomendamos una mezcla de corteza de pino, turba, styrofoam, gránulos de arcilla y carbón de leña (1:1:1:1:1). El tamaño de los componentes depende del tamaño de los plantones. Plantones separados Muy provechoso para el cultivo de los plantones separados es un invernadero en miniatura como el que se muestra en la siguiete imagen. Aquí tenemos la ventaja de poder ajustar el cambio de aire. Este nos da la posibilidad de fortalecer las plantas de durante un largo período de tiempo. Invernadero miniatura Contaminaciones ¿Qué son la contaminaciones? Si los hongos o bacterias comienzan a crecer sobre medios de cultivo, le llamamos una contaminación porque crecerán más rápido que las semillas de las orquídea y las matarán pronto. ¿Cuáles son las fuentes de la contaminación? Existen diferentes causas por las cuales puede aparecer la contaminación. - Esterilización fallada - Problemas en la técnica de esterilización - Tapas agujereadas ¿Cómo aparecen las contaminaciones? Muchas contaminaciones pueden ser encontradas 3 a 4 días después de enfrascar las semillas, planteletes (nodos) o protocormos. Aquí hay algunas señales de contaminaciones: - Crecimiento rápido de discos en el medio de cultivo - Crecimiento rápido de alfombra en el medio de cultivo (como pequeños pelos) - El medio de cultivo cambia a blanco y se vuelve líquido ¿Qué se debe hacer con frascos contaminados? Es muy importante detectar la contaminación en forma temprana, ya que crece en forma muy rápida. Si usted detecta el inicio de una contaminación, puede tratar de replantar en otro frasco, ‘limpiando’ las semillas o protocormos. Cuando usted cultiva nodos, puede esterilizar el nodo con una solución de Agua Oxigenada al 3% por 15 minutos y luego ponerlo en un nuevo medio de cultivo. Si alguno de sus frascos esta contaminado y no es capaz de rescatarlo en el mismo día, debe poner el frasco en un lugar oscuro y frio, ya que en esas condiciones la contaminación disminuirá su crecimiento. Bueno distinguidos foreros y Orquidiotas tooodos, espero que lo anterior sea de vuestro agrado y lo mas importante, que sea útil para vuestro empeño de "dar a luz una Orquidea" Salu2s
muchas gracias por volver a subir el post, ignoro como has recperado los mensajes pperdidos, pero repito muchas gracias, ya que lo vengo siguiendo con interes, mis vainas siguen creciendo, a ver si tengo suerte, por cierto me gustó el sistema de Marylú, el del frasco y el musgo me parece muy sencllo, probaré suerte.- el otro me parece muy complicado para la gente de a pié. habia tambien uno muy interesante de samsagaz sobre un trozo de corteza, a ver si lo vuelve a subir, y no sé que pasó en el foro con los post, no ha sido solo en orquideas, en el de rosas tambien se perdieron los mensajes, y los albumes, yo llevo tiempo aca y es la primera vez que pasa, saludos a todos
germinacion Hola Morgan. Muchas gracias por los aplausos, me alegro mucho que estes ya en este tema muy buena tu recopilacion de datos hacia falta ok. Morgan el metodo este del vapor a mi no me dio resultados pero venga a probar a ver si a ti te va mejor, el que me resulto fue con camara de sembrado sin flujo laminar esta es muy cara. A y te comento tambien que las formulas de medio que contengan tomate o alguna fruta un poco acida no sirve para las semillas de orquideas terrestres, yo uso la formula con platano y carbon activo y se puede eliminar el platano tambien. Un saludo a todos .
replante Se me olvido comentarte Morgan que el replante de protocornos no es necesario yo los dejo en el frasco un año entero y solo lo abro para sacarlos definitivamente los plantines, la unica ventaja que veo es que en cada frasco colocas pocas plantas pero se corre el riesgo de contaminacion por eso opte por eliminar esa etapa , te explico que tendras que sembrar pocas semillas en cada frasco ok.
muchas gracias por estos magnificos documentos!!! no se, continuo viendo lo de la siembra muy dificil... alguien lo ha hecho de alguna forma un poco menos "complicada"??