¿Qué contiene el medio de cultivo in vitro?

Tema en 'Cultivo in vitro de orquídeas' comenzado por orchiloco, 28/7/06.

  1. orchiloco

    orchiloco

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    :eyey: hola yo quisiera saber especificamente que es lo que el medio de cultivo lleva que no sea medio pythamax ni agar se los agrareceria mucho:5-okey:
     
  2. -_________

    -_________

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    Re: que contiene el medio de cultivo in'vitro

    :83orden: :9999991persecucion:
     
  3. Re: que contiene el medio de cultivo in'vitro

    Contiene Macro y micronutrientes, vitaminas, hormonas, agar-agar, sacarosa.

    Hay de miles de formulas
     
  4. hopelin

    hopelin

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    Re: que contiene el medio de cultivo in'vitro

    El medio de mayor aplicación en la germinación de semillas de orquídeas es el de Knudson (1951). En las fases de transplante se puede utilizar el mismo medio de germinación, adicionándole ciertos suplementos (vitaminas y aminoácidos), aún cuando no son estrictamente necesarios resultan beneficiosos para estimular el crecimiento de las plántulas.

    El medio básico de Knudson puede ser modificado para lograr mejor germinación en ciertas especies, por ejemplo, para Lycaste skinneri se modificó agregándole 40 g/l de sacarosa y 200 a 250 ml/l de agua de coco. Ardotto (1967) modificó la fórmula de Knudson agregando extracto de banano, con lo cual logró aumentar la tasa de crecimiento de las plántulas.

    El medio básico de Knudson se puede preparar o comprar como una fórmula comercial, previamente preparada sólida o líquida, con la cual se ahorra mucho tiempo y complicaciones al prepararlo.




    Componentes del medio Knudson C.

    componentes fórmula cantidad g/t
    Nitrato de calcio Ca (NO3)2 4H2O 1,0000
    Fosfato monopotásico KH2PO4 0,2500
    Sulfato de magnesio MgSO47 H2O 0,2500
    Sulfato de amonio (NH4)2 SO4 0.5000
    Sacarosa C12 H22 O11 20.000
    Sulfato de Hierro FeSO4 7 H20 0.0278
    --------------------- Na2 EDTA 0.0373
    Sales menores (MS) ----------------- 5.o ml

    Para preparar el medio se pesa en una balanza analítica las cantidades de los compuestos señalados anteriormente y se disuelven en un litro de agua destilada, ajustar el pH a 5.5 luego se le agrega el agente gelificante (agar-agar o phitage) y se calientan hasta que se hayan disuelto. Cuando el agente gelificante es agar se agrega la cantidad de 6,0 g/l y si se trata de phytagel se usa 2.0 g/l. Homogenizar el medio con agitación e introducirlo en el horno de microondas por 20 minutos. Una vez preparado el medio se distribuye entre los recipientes que se van a utilizar, se tapan y se introducen al autoclave para esterilizarlos a 121 grados C por 20 minutos, a 1.07 kg/cm2 de presión. El medio frío o solidificado puede guardarse en refrigeración hasta ser utilizado.

    El crecimiento de los protocormos se favorece cuando al medio básico se le añaden aminoácidos, vitaminas, reguladores de crecimiento (auxinas, citocinas) y eventualmente agua de coco o extractos vegetales como pulpa de banano, jugo de tomate, jugo de piña, papa; estos pueden utilizarse solos o en mezclas.


    Un saludo: :5-okey:

    Miguel Angel
     
  5. hopelin

    hopelin

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    Re: que contiene el medio de cultivo in'vitro

    Para sembrar semillas de orquideas:


    1 tomate maduro sin piel

    1 L de água destilada .

    1 cuchara de sopa de azúcar comun, (podiendo ser sustituído por 20 gr de dextrosa, mel... etc).

    13 ½ gr de agar agar (farmacia de manipulación)

    abonos 30-10-10 ou 20-10-10 (abonos cargados en Nitrógeno)



    LA formula de Juvenal Meyer es una de las que pueden ser usadas:



    500 ml de agua de preferencia filtrada o destilada.

    500 ml (o gramos) de jugo de tomate (pasar por batidora o licuadora 1 tomate grande y maduro sin piel y sin simientes)

    20 gr de azucar, miel, glucosa o dextrosa

    14 gr de agar agar en polvo

    2 gr de carbon activado en polvo (farmácia de manipulación)

    1 gr de buena calidad de formulación 30-10-10

    Un saludo: ;)

    Miguel Angel